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luciferjoe

铜虫 (初入文坛)

[求助] 双分子荧光诡异了,求赐教!

做了个双分子荧光验证蛋白互作,用空载体做对照,结果两个空载体也发黄色荧光,还比连有互作蛋白基因的载体所发的黄色荧光更强。。。我用没注射过的叶片测了一下,没有黄色荧光。
不知道这是什么情况,求赐教!
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
启动子太strong,即使没有作用也会有荧光。用基因本身的启动子有时候太弱又看不到荧光。实验嘛就是这样。如果有可能最好用可以调控的启动子。
2楼2012-12-17 13:30:25
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luciferjoe

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-17 15:30:25
启动子太strong,即使没有作用也会有荧光。用基因本身的启动子有时候太弱又看不到荧光。实验嘛就是这样。如果有可能最好用可以调控的启动子。

再请教一下,双分子荧光一般是不是不把N/C空载体作为对照啊?我看了几篇文献都没有提到,只是用单独N和C加目的片段做对照
3楼2012-12-18 12:54:02
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by luciferjoe at 2012-12-18 12:54:02
再请教一下,双分子荧光一般是不是不把N/C空载体作为对照啊?我看了几篇文献都没有提到,只是用单独N和C加目的片段做对照...

当然是最好把两个空载体也做对照的,如果你可以控制好背景的话。当然用一个加目的片段的对照一般是比较漂亮的。
4楼2012-12-18 13:40:46
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