应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 表达的蛋白质偏小
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1622  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Tporker

金虫 (小有名气)

[求助] 表达的蛋白质偏小

最近表达的蛋白质总是偏小，不知道是何原因？大肠杆菌表达，质粒的序列进行测序，没有位点突变，并且完整。表达后的菌体收集冷冻直至进行破碎，通过镍柱和麦芽糖柱纯化以后，进行SDS-PAGE，发现纯化的蛋白质大小偏小。哪位大侠给帮帮忙，分析下会是哪方面的原因？感激不尽
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
值，夜渐浓，闻窗外蛙鸣，辗转无眠难入梦；此，风渐清，听庭内雨应，悱恻浮醒忆青笼。
1楼 2012-12-11 09:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by Tporker at 2012-12-11 15:27:02
变性胶，跑出来是两条带，一条大小正好，另一条偏小20KD且为主条带。进行活性测试，发现活性很低，基本是1U/μL或2U/μL...

你检查一下构建的载体上除了目的基因的ATG以外附近是不是还有其他ATG。有时候由于克隆原因可能出现其他转录起点而造成有不同的表达蛋白出来。
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-12 08:03:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
SDS-PAGE下的表观分子量与理论值不符的情况时有发生。因为SDS-PAGE除了有分子筛效应以外，还有电荷效应。从胶上看小不一定真的就是分子量小。不用太纠结。
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-11 11:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aaa6239

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也遇到了
我还以为是信号肽被切除所致。后来请教高手，人家说也可能是蛋白修饰或者电荷差异所致。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-11 15:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tporker

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-11 11:31:01
SDS-PAGE下的表观分子量与理论值不符的情况时有发生。因为SDS-PAGE除了有分子筛效应以外，还有电荷效应。从胶上看小不一定真的就是分子量小。不用太纠结。

变性胶，跑出来是两条带，一条大小正好，另一条偏小20KD且为主条带。进行活性测试，发现活性很低，基本是1U/μL或2U/μL
赞一下 回复此楼
值，夜渐浓，闻窗外蛙鸣，辗转无眠难入梦；此，风渐清，听庭内雨应，悱恻浮醒忆青笼。
4楼2012-12-11 15:27:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料考研调剂 +3 Gs大王 2026-04-02 3/150 2026-04-02 00:34 by 2026材料调剂
[考研] 286求调剂 +16 PolarBear11 2026-03-26 16/800 2026-04-01 21:31 by 七度不信任
[考研] 建环，能源，土木老师路过看一看！！！ +4 嘿嘿uu 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:42 by 无懈可击111
[考研] 一志愿北交大材料工程，总分358 +3 cs0106 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:15 by wxiongid
[考研] 材料科学与工程339求调剂 +11 hyz0119 2026-03-31 12/600 2026-04-01 18:40 by 伟大河北
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-01 15:39 by 好好读书。
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
[考研] 291求调剂 +3 迷蒙木木 2026-04-01 4/200 2026-04-01 11:07 by 逆水乘风
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:07 by Wang200018
[考研] 070300化学354求调剂 +15 101次希望 2026-03-28 15/750 2026-03-31 17:58 by jp9609
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 本科211生物医学工程085409求调剂339分 +7 里子木yy 2026-03-29 7/350 2026-03-31 14:35 by fmesaito
[考研] 286求调剂 +5 丢掉懒惰 2026-03-27 8/400 2026-03-31 11:27 by Delta2012
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 调剂 +4 GK72 2026-03-30 4/200 2026-03-30 20:32 by dick_runner
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂！！！ +5 贝呗钡钡 2026-03-30 5/250 2026-03-30 18:16 by 无际的草原
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +7 Shern—- 2026-03-28 7/350 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
[考研] 295求调剂 +5 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:04 by fmesaito
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭