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baobaoql

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[交流] 原生质体亚细胞定位--长片段已有1人参与

最近在做拟南芥原生质体转化，做过的童鞋大家交流一下吧。
如果候选基因编码的是膜蛋白，或者是定位在细胞器膜，例如液泡膜，线粒体膜之类的，用拟南芥原生质体也能做吗？
最近按照步骤进行操作，质粒用量达10ug，但是空载体转化成功，目的载体还是不行，请教下大家，1.5KB,2KB的片段容易转化吗？跟基因片段大小有没关系？我们用的GFP载体不大，是瞬时转化用的载体。
有做过的同学交流一下吧

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1楼 2012-12-10 14:58:04

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kun2199

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★
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你的空载体转化效率高吗？想问你一个问题，加入质粒和原生质体后，再加入40%的PEG4000后，会不会出现原生质结成团块的现象，还有转化之前，你们有测过原生体的数量吗？

2楼2013-05-10 16:09:14

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baobaoql

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引用回帖:

2楼: Originally posted by kun2199 at 2013-05-10 16:09:14
你的空载体转化效率高吗？想问你一个问题，加入质粒和原生质体后，再加入40%的PEG4000后，会不会出现原生质结成团块的现象，还有转化之前，你们有测过原生体的数量吗？

有时候我感觉会有结成团块的现象，是不是原生质体太多了？

3楼2013-11-18 14:30:20

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