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baobaoql

新虫 (初入文坛)

[交流] 原生质体亚细胞定位--长片段 已有1人参与

最近在做拟南芥原生质体转化,做过的童鞋大家交流一下吧。
如果候选基因编码的是膜蛋白,或者是定位在细胞器膜,例如液泡膜,线粒体膜之类的,用拟南芥原生质体也能做吗?
最近按照步骤进行操作,质粒用量达10ug,但是空载体转化成功,目的载体还是不行,请教下大家,1.5KB,2KB的片段容易转化吗?跟基因片段大小有没关系?我们用的GFP载体不大,是瞬时转化用的载体。
有做过的同学交流一下吧
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kun2199

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的空载体转化效率高吗?想问你一个问题,加入质粒和原生质体后,再加入40%的PEG4000后,会不会出现原生质结成团块的现象,还有转化之前,你们有测过原生体的数量吗?
2楼2013-05-10 16:09:14
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baobaoql

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kun2199 at 2013-05-10 16:09:14
你的空载体转化效率高吗?想问你一个问题,加入质粒和原生质体后,再加入40%的PEG4000后,会不会出现原生质结成团块的现象,还有转化之前,你们有测过原生体的数量吗?

有时候我感觉会有结成团块的现象,是不是原生质体太多了?
3楼2013-11-18 14:30:20
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