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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶学性质米氏常数的测定

要准备做米氏常数测定了,之前实验用的底物浓度是5g/L,如果做米氏常数测定选取不同的底物浓度,选择5g/L、10g/L、15g/L、20g/L可以吗?我不太清楚底物浓度的选择是不是有什么要求?不能太大还是不能太小?麻烦大家帮我看一下吧~
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

楼主自己顶一下~
2楼2012-12-10 14:15:57
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sdgxz

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
哆啦B梦1024: 金币+4, 有帮助 2012-12-10 15:37:48
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 15:57:19
这个不好说吧,我的经验是你可以在现在的浓度基础上上下取值,然后先估计出大概的Km值。最终测定的底物浓度应该在3Km到1/3Km之间。
3楼2012-12-10 15:30:11
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by sdgxz at 2012-12-10 15:30:11
这个不好说吧,我的经验是你可以在现在的浓度基础上上下取值,然后先估计出大概的Km值。最终测定的底物浓度应该在3Km到1/3Km之间。

谢谢啊!
4楼2012-12-10 15:38:04
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
哆啦B梦1024: 金币+3, 有帮助 2012-12-11 12:30:47
我上课的时候,老师说的是1/10,10 Km浓度,

如果不存在底物抑制的时候,尽可能做一个浓度最高的底物,得到psudo-zero order reaction,得到Vmax,然后降低浓度,测定V,这个时候就可以大致估算出Km了。
行至水穷处,坐看云起时
5楼2012-12-10 16:58:02
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-10 16:58:02
我上课的时候,老师说的是1/10,10 Km浓度,

如果不存在底物抑制的时候,尽可能做一个浓度最高的底物,得到psudo-zero order reaction,得到Vmax,然后降低浓度,测定V,这个时候就可以大致估算出Km了。

好的 谢谢你!
6楼2012-12-11 12:30:27
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sdgxz

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2012-12-10 15:38:04
谢谢啊!...

不用谢,祝实验顺利
7楼2012-12-12 13:01:01
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