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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶学性质米氏常数的测定
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶学性质米氏常数的测定

要准备做米氏常数测定了，之前实验用的底物浓度是5g/L，如果做米氏常数测定选取不同的底物浓度，选择5g/L、10g/L、15g/L、20g/L可以吗？我不太清楚底物浓度的选择是不是有什么要求？不能太大还是不能太小？麻烦大家帮我看一下吧~
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1楼 2012-12-10 12:02:25
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)
楼主自己顶一下~
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2楼2012-12-10 14:15:57
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sdgxz

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
哆啦B梦1024: 金币+4, ★有帮助 2012-12-10 15:37:48
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 15:57:19
这个不好说吧，我的经验是你可以在现在的浓度基础上上下取值，然后先估计出大概的Km值。最终测定的底物浓度应该在3Km到1/3Km之间。
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-10 15:30:11
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sdgxz at 2012-12-10 15:30:11
这个不好说吧，我的经验是你可以在现在的浓度基础上上下取值，然后先估计出大概的Km值。最终测定的底物浓度应该在3Km到1/3Km之间。

谢谢啊！
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4楼2012-12-10 15:38:04
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
哆啦B梦1024: 金币+3, ★有帮助 2012-12-11 12:30:47
我上课的时候，老师说的是1/10，10 Km浓度，

如果不存在底物抑制的时候，尽可能做一个浓度最高的底物，得到psudo-zero order reaction，得到Vmax，然后降低浓度，测定V，这个时候就可以大致估算出Km了。
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行至水穷处，坐看云起时
5楼2012-12-10 16:58:02
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哆啦B梦1024

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-10 16:58:02
我上课的时候，老师说的是1/10，10 Km浓度，

如果不存在底物抑制的时候，尽可能做一个浓度最高的底物，得到psudo-zero order reaction，得到Vmax，然后降低浓度，测定V，这个时候就可以大致估算出Km了。

好的 谢谢你！
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6楼2012-12-11 12:30:27
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sdgxz

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 哆啦B梦1024 at 2012-12-10 15:38:04
谢谢啊！...

不用谢，祝实验顺利
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7楼2012-12-12 13:01:01
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