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笑笑2697

铁虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达

我截取催化活性部分的基因对其进行表达,为什么截取的小片段基因不表达呢?
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笑笑2697

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by post_ngao at 2012-12-10 21:51:40
情报太少了,很难判断。有可能是质粒构建的问题;有可能是宿主的问题;也有可能是表达的问题。不知楼主用的是什么质粒,什么宿主,什么条件。7-8kd确实不太大,不过如果宿主选择的没问题,表达条件都正确的话应该不 ...

pcold1,  E.coli   根据楼上的解答,我觉得应该是N端规则引起的~
6楼2012-12-10 22:17:31
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
也许是蛋白不稳定呢,表达但是降解了,太小的蛋白是不太稳定的,还有一个N端氨基酸规则。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2012-12-10 10:13:29
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sdgxz

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以看一下08年nature上的这篇文章:Protein production and purification
3楼2012-12-10 15:37:25
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笑笑2697

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2012-12-10 10:13:29
也许是蛋白不稳定呢,表达但是降解了,太小的蛋白是不太稳定的,还有一个N端氨基酸规则。

我的蛋白7、8kd。如果降解的话应该怎么避免降解呢?N端氨基酸规则具体指的是什么呢~
4楼2012-12-10 20:46:47
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