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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 纤维素分解菌，望高人指教
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龙啸0216

铜虫 (初入文坛)

[求助] 纤维素分解菌，望高人指教 已有1人参与

目前在做纤维素分解菌的提取工作，培养基为羧甲基纤维素钠、硫酸镁、酵母粉、磷酸氢二钾、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉；用1mg/L的刚果红染色15min、1mol/L的氯化钠脱色10min.发现菌体随着刚果红废液脱落，未出现透明圈，洗去菌体的地方未显红色，请问这能说明所提取的菌株无法降解纤维素吗？还有就是怎么能避免菌体脱落现象。。。谢谢
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新兵蛋子~~~
1楼 2012-12-07 19:58:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

WSW_Alone

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by mashuge at 2013-05-15 18:37:23
我想问下，在配置次培养基时培养基很粘稠不像LB那样，是不是我哪出错了，还是他就是这样子啊...

刚果红培养基配完了不会很粘稠啊，你是不是CMC-Na加多了？
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處世樹為模，本固任從枝葉動；立身錢作樣，內方還要外邊圓。
7楼2013-05-15 19:27:24
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普通回帖

张建荣

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
龙啸0216: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-12-20 13:27:43
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2012-12-20 14:58:50
这个你再怎么小心他都会脱落的，你应该将菌分离出来，完了再在选择培养基上用点种法检测，
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执着
2楼2012-12-19 15:57:04
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north_coco887

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

刚果红是不是有一个专用的培养基？只用刚果红做过纤维素酶的活性染色，是先染到胶上，再进行作用。
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3楼2012-12-20 12:52:28
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龙啸0216

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by north_coco887 at 2012-12-20 12:52:28
刚果红是不是有一个专用的培养基？只用刚果红做过纤维素酶的活性染色，是先染到胶上，再进行作用。

请问是什么胶啊？
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新兵蛋子~~~
4楼2012-12-20 13:26:57
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
龙啸0216: 金币+10, 不好意思，才看到，谢谢。 2013-01-09 10:03:26
CMC-Na 2.0g, (NH4)2SO4 2.0g, MgSO4•7H2O 0.5g, K2HPO4 1.0g, 刚果红0.4g, 琼脂15~20g, 去离子水1000mL, pH 7.0。直接添加刚果红到固体培养基中，然后再把菌种接到平板上，降解菌就会出现水解圈了。
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5楼2012-12-21 11:12:29
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mashuge

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by WSW_Alone at 2012-12-21 11:12:29
CMC-Na 2.0g, (NH4)2SO4 2.0g, MgSO4•7H2O 0.5g, K2HPO4 1.0g, 刚果红0.4g, 琼脂15~20g, 去离子水1000mL, pH 7.0。直接添加刚果红到固体培养基中，然后再把菌种接到平板上，降解菌就会出现水解圈了。

我想问下，在配置次培养基时培养基很粘稠不像LB那样，是不是我哪出错了，还是他就是这样子啊
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珍惜自己现在拥有的，别等失去才追悔莫及，人只有经历了才会懂才会成熟，加油，未来的日子好好过！
6楼2013-05-15 18:37:23
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aoying2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

根据你培养基来看，你的培养基不对。把其中酵母粉、蛋白胨去掉，改用无机氮源，如硫酸铵、氯化铵或者硝酸铵等。

纤维素酶应该是一种诱导酶，只有存在纤维素类物质时才可能诱导出来。因此，你的培养基存在酵母粉、蛋白胨，这两种都是一种速效氮源，菌体会先利用它们，就会影响菌体产酶。
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8楼2013-05-15 20:22:30
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mashuge

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by WSW_Alone at 2013-05-15 19:27:24
刚果红培养基配完了不会很粘稠啊，你是不是CMC-Na加多了？...

我看的浙江大学付丽丽的作物秸秆的纤维素降解菌的分离与筛选优秀硕士论文里的培养基，不过我也觉得可能我的培养基中的羧甲基纤维素钠加多了，还有我看有培养基中加氯化钠PH7.0？这是什么做样？
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9楼2013-05-22 00:09:23
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mashuge

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by aoying2008 at 2013-05-15 20:22:30
根据你培养基来看，你的培养基不对。把其中酵母粉、蛋白胨去掉，改用无机氮源，如硫酸铵、氯化铵或者硝酸铵等。

纤维素酶应该是一种诱导酶，只有存在纤维素类物质时才可能诱导出来。因此，你的培养基存在酵母粉、 ...

我用的是硫酸铵，不过菌落很小，还没有透明圈。我都在想是不是加有机氮源了
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10楼2013-05-22 00:11:11
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