应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 血清WB操作步骤
101/1返回列表
查看: 4555  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

生物小通

木虫 (正式写手)

[求助] 血清WB操作步骤

RT，尤其是样品处理
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
学习，进步
1楼 2012-12-05 23:22:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是要直接用血清做，还是先提蛋白再做？
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-06 08:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物小通

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zx1984 at 2012-12-06 08:27:51
你是要直接用血清做，还是先提蛋白再做？

两个都行，关键是提蛋白怎么提，提出来怎样平衡是提取的血清量的不同还是表达量的不同导致了最终的wb结果，管家基因只能出结果的时候才知道。
赞一下 回复此楼
学习，进步
3楼2012-12-06 09:10:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先提取血细胞，然后抽取蛋白
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-06 11:34:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物小通

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jl860822 at 2012-12-06 11:34:46
先提取血细胞，然后抽取蛋白

我用血清，血细胞在促凝管中已经分离了
赞一下 回复此楼
学习，进步
5楼2012-12-06 16:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaorongbest

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
生物小通: 金币+5, ★有帮助 2012-12-10 11:45:49
引用回帖:
3楼: Originally posted by 生物小通 at 2012-12-06 09:10:41
两个都行，关键是提蛋白怎么提，提出来怎样平衡是提取的血清量的不同还是表达量的不同导致了最终的wb结果，管家基因只能出结果的时候才知道。...

“出来怎样平衡是提取的血清量的不同还是表达量的不同导致了最终的wb结果”这个很简单啊，这是看你用的抗体是什么抗体，然后根据内参来相对定量你的抗体所对应的蛋白含量，跟提取量没有绝对关系，只是提取量少难以检测罢了
赞一下 回复此楼
为客户提供更好的科研外包服务：如分子、免疫、病理、细胞培养、动物实验等
6楼2012-12-07 15:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 生物小通 at 2012-12-06 16:18:58
我用血清，血细胞在促凝管中已经分离了...

用相同量的血清，离心得到沉淀，然后用RIPA破碎细胞，得到粗蛋白。有专门的试剂盒做核蛋白。
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-07 16:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物小通

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zx1984 at 2012-12-07 16:31:50
用相同量的血清，离心得到沉淀，然后用RIPA破碎细胞，得到粗蛋白。有专门的试剂盒做核蛋白。...

我做肝癌的血清标志物分析，做血清，不要细胞。
赞一下 回复此楼
学习，进步
8楼2012-12-07 16:49:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生物小通

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by gaorongbest at 2012-12-07 15:05:32
“出来怎样平衡是提取的血清量的不同还是表达量的不同导致了最终的wb结果”这个很简单啊，这是看你用的抗体是什么抗体，然后根据内参来相对定量你的抗体所对应的蛋白含量，跟提取量没有绝对关系，只是提取量少难以 ...

这个好难，做了一次，按照样品4:1的比例处理，结果点样时发现样品都凝固了。你知道有啥好方法，怕稀释到时候看不到条带了
赞一下 回复此楼
学习，进步
9楼2012-12-07 17:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
生物小通: 金币+10, ★★★很有帮助, 我试试看 2013-01-15 14:53:56
按照样品4:1的比例处理，然后加少量的甘油，之后离心上样
赞一下 回复此楼
10楼2013-01-14 11:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 生物小通 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 297，工科调剂? +11 河南农业大学-能 2026-04-14 11/550 2026-04-19 20:07 by Equinoxhua
[考博] 申博自荐 +4 Linxia林夏 2026-04-13 4/200 2026-04-19 19:55 by Equinoxhua
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 291求调剂 +12 关忆北. 2026-04-14 13/650 2026-04-19 16:50 by 中豫男
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +10 lzmk 2026-04-14 11/550 2026-04-19 16:42 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 22408 312求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-14 26/1300 2026-04-18 13:04 by wunaiy88
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[基金申请] RY：中国产出的科学垃圾论文，绝对数量和比例都世界第一 +7 zju2000 2026-04-14 18/900 2026-04-16 11:36 by 欢乐颂叶蓁
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭