【答案】应助回帖

质本洁来还洁去

11楼2012-12-07 09:23:06

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感谢参与，应助指数 +1

你用什么菌种做的？
消泡剂加多了有影响，当不会这么明显。

质本洁来还洁去

12楼2012-12-07 09:23:43

ecolibl21

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pH变化如何？15字15字15字15字

PCR发明人穆利斯的成功表明，想象力推动进步

13楼2012-12-07 09:58:33

飘零的叶子

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9楼: Originally posted by a404467415 at 2012-12-06 15:34:42
楼主能说一下发酵的是什么菌种吗？我们一直都是高密度发酵从未出现你说的这种情况，从你描述的情况来看我觉得有一下几个原因
1.菌种的问题，种子活力不够
2.培养基不的问题。不适合菌种的生长
3.也有可能就 ...

是大肠杆菌JM109，培养基是我们实验室一直在用的，配方没有问题的，那在哪个步骤可能染菌呢？！

14楼2012-12-07 10:20:08

飘零的叶子

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13楼: Originally posted by ecolibl21 at 2012-12-07 09:58:33
pH变化如何？15字15字15字15字

PH没怎么变化

15楼2012-12-07 10:20:43

a404467415

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★ ★
scelab: 金币+2, 谢谢交流 2012-12-07 14:50:59

引用回帖:

14楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2012-12-07 10:20:08
是大肠杆菌JM109，培养基是我们实验室一直在用的，配方没有问题的，那在哪个步骤可能染菌呢？！...

从母菌库里重新活化吧，我怀疑你的平板或者摇瓶的种子都有可能！

TheLordpreferscommon-lookingpeople.Thatisthereasonhemakessomanyofthem.

16楼2012-12-07 12:01:51

飘零的叶子

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16楼: Originally posted by a404467415 at 2012-12-07 12:01:51
从母菌库里重新活化吧，我怀疑你的平板或者摇瓶的种子都有可能！...

将在摇床的菌拿出在室温静置对菌会有什么影响呢？！菌会死掉吗？！

17楼2012-12-07 17:40:23

daiybe

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从你的表述中(溶氧不变和OD值不变)，我可以肯定一个事实：菌体根本没有在利用碳源，这是菌体不能生长的根本原因。那么我就两个疑问问楼主了，第一，你的发酵配方中是否有碳源或者碳源是否充足？第二，你的发酵配方是否正确？还要看看你的菌种是否有特异性的物质需求，举个例子，毕赤酵母的的发酵中，如果少了生物素，那么也是不会长的。

爱一个人，比恨一个人难的太多了

18楼2012-12-08 16:36:00

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18楼: Originally posted by daiybe at 2012-12-08 16:36:00
从你的表述中(溶氧不变和OD值不变)，我可以肯定一个事实：菌体根本没有在利用碳源，这是菌体不能生长的根本原因。那么我就两个疑问问楼主了，第一，你的发酵配方中是否有碳源或者碳源是否充足？第二，你的发酵配方是 ...

发酵配方是没有问题的，就是我们实验室一直用的，摇瓶也是一样的配方，菌种就是大肠杆菌JM109。最初的几个小时里菌是没有生长，在上罐后12小时后OD值开始疯狂的增长，溶氧变化也很大，一直在降，我想知道的是这是二次生长还是就是这个菌的适应期比较长。还有就是插入不同的重组基因片段是不是对菌的生长有很大影响？！

19楼2012-12-09 15:57:03

daiybe

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19楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2012-12-09 15:57:03
发酵配方是没有问题的，就是我们实验室一直用的，摇瓶也是一样的配方，菌种就是大肠杆菌JM109。最初的几个小时里菌是没有生长，在上罐后12小时后OD值开始疯狂的增长，溶氧变化也很大，一直在降，我想知道的是这是二 ...

一般，转罐后，菌体要有几个小时的适应期，一般不超过5个小时，OD疯长是对的，溶氧下降也是对的，没任何问题，插入基因片段是否有影响，这要看你的基因表达产物对菌体的影响，前期能长，说明没问题

爱一个人，比恨一个人难的太多了

20楼2012-12-09 16:59:53