| 查看: 2376 | 回复: 10 | |||||
| 本帖产生 1 个 ACI ，点击这里进行查看 | |||||
royalwang铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
想测一个荧光化合物的激发和发射波长
|
||||
| 想测一个荧光化合物的激发和发射波长。我采用固定激发扫发射，然后再固定发射扫激发，来回这样几次，发现发射的波长总是激发波长的2倍，猜测是倍频峰。这样测出来的激发和发射波长，应该不是化合物真实的波长吧。请教各位，应该怎么办！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 化学污染与环境健康 | 资源 |
» 猜你喜欢
找不到审稿人
已经有6人回复
-
职称论文
已经有13人回复
-
核心期刊那个阶段最难
已经有4人回复
-
小论文影响大论文查重吗？
已经有4人回复
-
博后面上太难了
已经有17人回复
-
大学老师
已经有14人回复
-
angew三个小修，返修过去已经20多天了没动静，有朋友遇到这种情况吗？
已经有4人回复
-
变性人申请基金咋算性别？
已经有21人回复
-
博后资助名单出来了
已经有14人回复
-
去年七月底入站的还能申请下一批吗？
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 一个样品进行荧光光谱测定时，最大发射波长随着激发波长的改变而改变，怎么回事
已经有12人回复
- 怎样测定物质的荧光光谱
已经有5人回复
- 荧光仪测出的波长与液相上使用的波长不一致
已经有3人回复
- 荧光光谱中激发波长的选择
已经有8人回复
- 求高手指点：固体荧光量子产率与激发波长的关系
已经有9人回复
- 怎么确定一个设计的化合物是否具有荧光性能？
已经有9人回复
- 荧光测试的激发波长与发射波长的问题
已经有4人回复
- 我的荧光物质，为什么我的激发波长大于发射波长
已经有14人回复
- 铁在分子荧光的激发和发射波长
已经有2人回复
- 请问有没有量子点或荧光染料分子的激发和发射波长在600多和700多nm的
已经有6人回复
- 荧光发射光谱中的拉曼峰
已经有4人回复
- 【求助】测定物质的荧光强度，激发波长的荧光强度比发射波长的荧光强度高很多的原因有
已经有4人回复
- 【求助】测定荧光量子产率时如何除氧？？需不需要除氧？以及激发波长的Abs小于0.05的�
已经有13人回复
- 【求助】未知物质的荧光波长
已经有10人回复
- 【求助】荧光检测中出现激发波长比发射波长长的情况
已经有8人回复
- 【求助】表面活性剂胶束聚集数测定问题
已经有18人回复
- 【讨论】请问 荧光光谱 怎么确定激发波长？
已经有3人回复
- 【讨论】用同一个荧光仪测定样品发的黄光和绿光的波长怎么几乎没有差异呢
已经有7人回复
- 【求助】请问荧光发射波长会随激发波长改变而改变吗？
已经有10人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
royalwang: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-12-06 23:00:41
xbqewpq: 金币+2, ACI+1, 鼓励交流~精华 2012-12-07 12:19:09
感谢参与，应助指数 +1
royalwang: 金币+20, ★★★很有帮助 2012-12-06 23:00:41
xbqewpq: 金币+2, ACI+1, 鼓励交流~精华 2012-12-07 12:19:09
|
荧光光度计通常采用光栅来进行波长的准确定位，通过光的衍射和干涉得到明暗条纹，不同波长光的最强衍射花纹出现的位置稍有差别，从而通过光栅把一束混合光按分解成不同波长依次摆列的光带，一般而言，单位长度内，光栅条纹越多，分光效果越好，通过光栅的偏转和出射狭缝的偏移，得到不同波长的光。但是按照光的衍射定律，光在nλ都会发生衍射现象，因此300nm在600nm，900nm出也会发生衍射。 荧光光度计通常使用两组分光器，激发一个，发射一个。并且两束光通常呈90°，测定发射光谱时，激发波长固定，发射光分光器在一定波长范围内偏转得到不同波长的强度，但偏转到激发波长的整数倍时，激发光也能发生衍射现象，即与发射光混合。一般来说，激发光强度很大，而发射光强度较小，因此出现倍频峰。 液体样品的浓度比较大时，对激发光的吸收比较强，且倍频峰处的发射光强度比较大，这是测定的倍频峰不明显，其他时候都需要处理，加滤光片，或者通过数据处理把倍频峰消掉（倍频峰一般是半峰宽较窄的对称峰）。 比如400nm的滤光片应该是400nm长通的滤光片，也就是说400nm以后的光通过，400nm以前的光滤掉了，因此不会滤掉发射峰。 你用300nm激发，在600nm肯定有倍频峰，在900nm会有三倍频，这些倍频峰都可以通过滤光片滤掉。由于这些倍频峰都是因为300nm的激发光引起的，而不是实际存在这样的荧光峰，因此，只需要将300nm的激发光滤去即可消除倍频。 选用滤光片时，应该综合考虑你的激发光和发射光谱的宽度，如果你的发射光谱在400nm的地方已经有峰了，而且400nm的峰对你很重要，那就应该选择更低一点的长通滤光片。 此外，滤光片应该置于发射窗口之前，样品池之后。 |
3楼2012-12-06 20:56:05
feifeitangme
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 250.2
- 散金: 2
- 红花: 1
- 帖子: 47
- 在线: 14小时
- 虫号: 1658204
- 注册: 2012-03-02
- 性别: MM
- 专业: 无机材料化学
2楼2012-12-06 20:00:31
royalwang
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 6371.3
- 散金: 4008
- 红花: 9
- 帖子: 1748
- 在线: 545.7小时
- 虫号: 438540
- 注册: 2007-09-25
- 专业: 环境污染化学
4楼2012-12-06 22:58:51
royalwang
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 6371.3
- 散金: 4008
- 红花: 9
- 帖子: 1748
- 在线: 545.7小时
- 虫号: 438540
- 注册: 2007-09-25
- 专业: 环境污染化学
5楼2012-12-06 23:04:14
6楼2012-12-07 09:26:18
daishenhua
金虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 969.4
- 红花: 5
- 帖子: 453
- 在线: 91.4小时
- 虫号: 511415
- 注册: 2008-02-25
- 性别: MM
- 专业: 功能陶瓷
7楼2012-12-07 11:44:26
波斯米亚
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 85 (初中生)
- 金币: 7904.2
- 散金: 100
- 红花: 13
- 帖子: 1312
- 在线: 563.2小时
- 虫号: 1248066
- 注册: 2011-03-28
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
8楼2012-12-07 14:41:35
9楼2012-12-10 14:14:09
10楼2012-12-10 14:16:53
20