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柠檬大虫

新虫 (初入文坛)

[求助] 真菌DNA提取完,pcr没有结果怎么办,附基因组DNA电泳图

我采用CTAB法提取的真菌DNA,可是电泳图这样可以么,我用真菌通用引物PCR,怎么都P不出来,望高手指教下,看是否我提取的有问题,还是哪里的问题,我上一批也是同样的方法,只是最后的条带没有那么亮,都P得出来。
望高手解释下我的电泳图啊,万分感谢

新图8.jpg
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ZOEY21

金虫 (小有名气)

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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-07 16:32:19
可能DNA浓度太大了,我们提的DNA稀释5倍后取2微升作模板,体系是50微升的。10微升体系加0.4微升的DNA也不算少。你可以做了梯度稀释DNA看下,5倍,10倍,20倍,50倍,100倍之类的吧
另外,蛋白、糖、酒精等杂质会影响扩增。RNA的话,普通pcr应该没问题,我是没特意处理过RNA,电泳图上一大片,PCR一样做出来
12楼2012-12-07 09:21:31
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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这个基因组提的非常不好,重新提吧
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-12-05 16:16:30
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-12-05 21:36:06
有蛋白等杂志,在胶孔附近,在酚氯仿离心吸取上清时,一定注意不能吸多了,以防吸到中间层等杂质,还有最好用Rnase处理一下
3楼2012-12-05 16:21:38
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nnnnn1

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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点样有点多,另外杂质有点多。
4楼2012-12-05 17:32:22
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