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90bp胶回收DNA转化后的平板一片混乱,求高人指点
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wjjia
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90bp胶回收DNA转化后的平板一片混乱,求高人指点
90bp胶回收DNA转化后的平板一片混乱,没有菌落,很浑浊,请问是怎么回事啊
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2012-12-05 15:56:10
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userhung
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wjjia(金币+1): 谢谢参与
同样很想知道哦~~~~~~~~~~~~
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2012-12-05 16:24:17
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★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
片段这么小?
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4楼
2012-12-06 08:36:33
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jane017
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wjjia(金币+1): 谢谢参与
wjjia: 金币+3
2012-12-06 09:39:13
是不是像大片菌苔样的?是蓝白斑筛选?
如果是的话,重新配下氨苄,重新配氨苄板,注意加氨苄时琼脂温度,重新做连接转化.
以上是我以前失败的经验
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2012-12-06 08:54:44
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cicelyzh
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★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
感觉是筛选板的问题。你转化是否做了正对照和负对照?是不是抗性失效了,重新做下板。
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6楼
2012-12-06 09:02:36
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wjjia
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:
Originally posted by
jane017
at 2012-12-06 08:54:44
是不是像大片菌苔样的?是蓝白斑筛选?
如果是的话,重新配下氨苄,重新配氨苄板,注意加氨苄时琼脂温度,重新做连接转化.
以上是我以前失败的经验
哦,原来是这个问题,我做了几次都是这样呢,是蓝白斑筛选,请问还有别的需要注意的细节吗?谢谢
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7楼
2012-12-06 09:39:01
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wjjia
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6楼
:
Originally posted by
cicelyzh
at 2012-12-06 09:02:36
感觉是筛选板的问题。你转化是否做了正对照和负对照?是不是抗性失效了,重新做下板。
没有做负对照,这个一定要做吗?还有你们的感受态是买的还是自己做的呢?再次感谢。
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8楼
2012-12-06 09:42:18
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cicelyzh
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2012-12-07 09:18:34
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8楼
:
Originally posted by
wjjia
at 2012-12-06 09:42:18
没有做负对照,这个一定要做吗?还有你们的感受态是买的还是自己做的呢?再次感谢。...
除非要求转化率高效的实验,感受态一般是用自己做的。负对照肯定要做,尤其是自己新做一批感受态,要确定感受态没有污染,同时验证抗性平板没问题。
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9楼
2012-12-07 07:20:24
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gdj363702043
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10楼
2012-12-08 16:47:25
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3楼
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