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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 90bp胶回收DNA转化后的平板一片混乱，求高人指点
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wjjia

金虫 (小有名气)

[交流] 90bp胶回收DNA转化后的平板一片混乱，求高人指点

90bp胶回收DNA转化后的平板一片混乱，没有菌落，很浑浊，请问是怎么回事啊
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1楼 2012-12-05 15:56:10
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
同样很想知道哦~~~~~~~~~~~~
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2楼2012-12-05 16:24:17
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
片段这么小？
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4楼2012-12-06 08:36:33
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jane017

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
wjjia: 金币+3 2012-12-06 09:39:13
是不是像大片菌苔样的?是蓝白斑筛选?
如果是的话,重新配下氨苄,重新配氨苄板,注意加氨苄时琼脂温度,重新做连接转化.
以上是我以前失败的经验
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5楼2012-12-06 08:54:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
wjjia(金币+1): 谢谢参与
感觉是筛选板的问题。你转化是否做了正对照和负对照？是不是抗性失效了，重新做下板。
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6楼2012-12-06 09:02:36
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wjjia

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jane017 at 2012-12-06 08:54:44
是不是像大片菌苔样的?是蓝白斑筛选?
如果是的话,重新配下氨苄,重新配氨苄板,注意加氨苄时琼脂温度,重新做连接转化.
以上是我以前失败的经验

哦，原来是这个问题，我做了几次都是这样呢，是蓝白斑筛选，请问还有别的需要注意的细节吗？谢谢
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7楼2012-12-06 09:39:01
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wjjia

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-06 09:02:36
感觉是筛选板的问题。你转化是否做了正对照和负对照？是不是抗性失效了，重新做下板。

没有做负对照，这个一定要做吗？还有你们的感受态是买的还是自己做的呢？再次感谢。
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8楼2012-12-06 09:42:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
wjjia: 金币+2 2012-12-07 09:18:34
引用回帖:
8楼: Originally posted by wjjia at 2012-12-06 09:42:18
没有做负对照，这个一定要做吗？还有你们的感受态是买的还是自己做的呢？再次感谢。...

除非要求转化率高效的实验，感受态一般是用自己做的。负对照肯定要做，尤其是自己新做一批感受态，要确定感受态没有污染，同时验证抗性平板没问题。
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9楼2012-12-07 07:20:24
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gdj363702043

金虫 (正式写手)
上图
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10楼2012-12-08 16:47:25
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TLnewjourney3楼
2012-12-05 16:33   回复  
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