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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问有谁用过millipore的超滤管？
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hallen6891

新虫 (小有名气)
tianhui725: 回帖置顶 2012-12-05 15:54:59
引用回帖:
10楼: Originally posted by tianhui725 at 2012-12-05 08:57:21
我用的是15ml的，是新的，不同细胞系提取的上清，都是5ml，离心半小时后所剩下的体积不同。可能我表述有误，我要的东西在上面。我现在就把滤得慢得再离心一会儿，只能达到每种差不多一致。不知这样对蛋白浓度有没有 ...

哦，不同细胞系所分泌的蛋白成分不一样的，那你出现这种情况应该正常，会对蛋白浓度有一定的影响，不过如果你的蛋白大小距离膜孔径较远（40KDa对应3KDa），那影响不大。超滤之后，计算好你的稀释倍数！祝试验顺利！
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生活要好好过！
11楼2012-12-05 09:29:02
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tianhui725

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by hallen6891 at 2012-12-05 09:29:02
哦，不同细胞系所分泌的蛋白成分不一样的，那你出现这种情况应该正常，会对蛋白浓度有一定的影响，不过如果你的蛋白大小距离膜孔径较远（40KDa对应3KDa），那影响不大。超滤之后，计算好你的稀释倍数！祝试验顺利！...

只能大概计算一下了，做不到那么精确。每种最后控制在两百微升。谢谢啦！
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12楼2012-12-05 15:52:29
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天蛇2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tianhui725 at 2012-12-04 10:33:46
浓缩前提取每种细胞的上清都是5ml，相同时间浓缩后所剩的毫升数不同，那么我以浓缩后的上清来做细胞因子的表达水平，进行对比的话，是不是已经不准确了？...

如果上清成份不完全相同当然会出现浓度后所剩体积不同，但是你可以自定一个量，不如浓缩5倍，哪个先到了就先取出，剩下的继续离心就可以了
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13楼2012-12-05 17:15:32
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tianhui725

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 天蛇2012 at 2012-12-05 17:15:32
如果上清成份不完全相同当然会出现浓度后所剩体积不同，但是你可以自定一个量，不如浓缩5倍，哪个先到了就先取出，剩下的继续离心就可以了...

嗯。我现在就是这么做的，只能看那个刻度，大概判断一下。谢谢！
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14楼2012-12-06 20:46:40
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溦馨

金虫 (小有名气)
准备纯化蛋白，能问下楼主15ml超滤管多少钱一个呀
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15楼2013-11-14 14:17:25
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1223163317

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by tianhui725 at 2012-12-05 08:57:21
我用的是15ml的，是新的，不同细胞系提取的上清，都是5ml，离心半小时后所剩下的体积不同。可能我表述有误，我要的东西在上面。我现在就把滤得慢得再离心一会儿，只能达到每种差不多一致。不知这样对蛋白浓度有没有 ...

请问你们，15ml超滤刚买来新的具体怎么使用，第一次接触没有说明书，不知道怎么处理，离心多大转速等等，谢谢
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16楼2015-01-04 20:15:14
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