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请问有谁用过millipore的超滤管?
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tianhui725
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请问有谁用过millipore的超滤管?
我想测细胞分泌的细胞因子,用millipore的超滤管将我需要的蛋白滤出,但是为什么相同体积(5ml)的上清,同时离心,剩下的液体体积却不同?有些剩下三百微升,有些五百微升。我该怎么控制将其条件设置成相同啊?求高人指点。
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1楼
2012-12-03 22:28:12
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天蛇2012
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引用回帖:
4楼
:
Originally posted by
tianhui725
at 2012-12-04 10:33:46
浓缩前提取每种细胞的上清都是5ml,相同时间浓缩后所剩的毫升数不同,那么我以浓缩后的上清来做细胞因子的表达水平,进行对比的话,是不是已经不准确了?...
如果上清成份不完全相同当然会出现浓度后所剩体积不同,但是你可以自定一个量,不如浓缩5倍,哪个先到了就先取出,剩下的继续离心就可以了
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13楼
2012-12-05 17:15:32
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cicelyzh
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专业: 生物化学
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★ ★
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tianhui725: 金币+1,
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2012-12-04 10:36:13
kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2012-12-04 12:22:29
浓缩的速度不会完全一样,样品中的蛋白浓度、杂质颗粒、缓冲液组分都有一定影响。最终的体积很难精确控制,如果体积大的样品,就稍微多离心一会。
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2楼
2012-12-04 08:00:12
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专业: 消化道动力异常及功能性胃
【答案】应助回帖
★
感谢参与,应助指数 +1
tianhui725: 金币+1,
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2012-12-04 10:36:27
管没用过,膜用过,可能与清洗不好有关,清洗终点要有量化的判断标准。不知道超滤时,你压力、时间等因素如何掌控。
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3楼
2012-12-04 08:44:39
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tianhui725
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专业: 消化系统肿瘤
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
cicelyzh
at 2012-12-04 08:00:12
浓缩的速度不会完全一样,样品中的蛋白浓度、杂质颗粒、缓冲液组分都有一定影响。最终的体积很难精确控制,如果体积大的样品,就稍微多离心一会。
浓缩前提取每种细胞的上清都是5ml,相同时间浓缩后所剩的毫升数不同,那么我以浓缩后的上清来做细胞因子的表达水平,进行对比的话,是不是已经不准确了?
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4楼
2012-12-04 10:33:46
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