应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有人测过NAD(P)H-醌还原酶(NADPH quinone reductase)的活性吗？
71/1返回列表
查看: 2063  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

linerlove114

新虫 (初入文坛)

[求助] 有人测过NAD(P)H-醌还原酶(NADPH quinone reductase)的活性吗？

有人测过NAD(P)H-醌还原酶活性吗？我不知道这样翻译是不是准确，英文表述是
NADPH quinone reductase。 文献上给的体系是20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.2 mM NADPH or NADH, 0.1 mM quinone（醌）和1ul的酶液，然后用分光光度计测吸光值变化。可是醌是水不溶的啊，其他明显是水溶的，怎么反应啊？需要用什么有机溶剂溶解醌类与水互溶，同时又不影响酶活性？求助高手！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-11-29 20:15:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
linerlove114: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-01 17:26:37
先配好Tris缓冲液。NADPH/NADH和醌是反应底物，测定时加样品后现加的。醌是用有机溶剂溶解的，可以用乙醇、甲醇或者DMSO先配置成浓缩的母液。
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-30 07:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linerlove114

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-30 07:10:05
先配好Tris缓冲液。NADPH/NADH和醌是反应底物，测定时加样品后现加的。醌是用有机溶剂溶解的，可以用乙醇、甲醇或者DMSO先配置成浓缩的母液。

非常感谢~你一定做过这个啦？乙醇、甲醇、DMSO不会影响蛋白活性吗？NADPH/NADH直接用水溶就可以吗？还是要用某种缓冲液溶解？
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-01 17:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
linerlove114: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-12-02 12:45:51
NADPH/NADH溶解在水里面，分装成小管，保存在-20°C，不要反复冻化。有机溶剂当然可能对酶活有一定影响，所以用量一定要少。一般根据实验需要醌配成100×或者200×的母液。
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-02 03:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linerlove114

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-02 03:26:48
NADPH/NADH溶解在水里面，分装成小管，保存在-20°C，不要反复冻化。有机溶剂当然可能对酶活有一定影响，所以用量一定要少。一般根据实验需要醌配成100×或者200×的母液。

十分感谢~
回复此楼
5楼2012-12-02 12:45:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linerlove114

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by linerlove114 at 2012-12-01 17:25:51
非常感谢~你一定做过这个啦？乙醇、甲醇、DMSO不会影响蛋白活性吗？NADPH/NADH直接用水溶就可以吗？还是要用某种缓冲液溶解？...

你好，按照你上次跟我说的方法，用乙醇和DMSO溶过醌类，首先，我用的辅酶Q10和维生素K3在乙醇中溶解度挺小的，所以配的浓度并不高，然后按文献上给的浓度算好加一定体积进去之后，溶液就变浑浊了，这是怎么回事？浑浊会影响吸光值测定吧？
赞一下 回复此楼
6楼2013-02-21 17:21:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LIVESOCCER

金虫 (正式写手)
楼主能给一下这个酶活性测定的方法文献么，感谢啊！
赞一下 回复此楼
7楼2019-09-26 11:52:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 linerlove114 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:38 by 学员8dgXkO
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +3 solanXXX 2026-03-20 3/150 2026-03-20 16:41 by fxue1114
[考研] 材料专硕英一数二306 +6 z1z2z3879 2026-03-18 6/300 2026-03-20 08:49 by xingguangj
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 332求调剂 +3 ydfyh 2026-03-17 3/150 2026-03-19 10:14 by 功夫疯狂
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭