应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » EDC/NHS活化金电极-硫醇后抗体固定不上
252/3返回列表上一页123下一页
查看: 3989  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

onlycwt

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by sailorlanyu at 2012-11-30 10:42:46
不怕，氮气吹不会把硫醇吹坏。EDC/NHS是要现配的。然后体系下，处理金电极的时候，不要加热到80度在硫酸/双氧水中超声。我们实验室就弄废过电极。泡着超声就好，别加热...

请问EDC/NHS溶液直接用水配还是用缓冲溶液呢，pH是多少比较好啊？我看有人用0.1M MES pH 6缓冲溶液,昨天我试了PBS pH 6的缓冲溶液活化效果不好。
赞一下 回复此楼
莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
11楼2012-11-30 11:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

onlycwt onlycwt
12楼2012-12-02 20:07:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-02 20:07:44
需要用缓冲液。
至于pH用多少要看你的实验。
如果一般链接反应大家做的实验有两种，一种是一锅法，直接加入EDC/NHS，溶液中的带氨基和带羧基的化合物直接活化反应，这步要避免使用带氨基或羟基的缓冲液，一般pH在 ...

太感谢了，你一言顶我看好多文献总结。
我的是分两步反应的，先活化，再滴涂抗体。
请问第一步活化的缓冲剂有要求吗？用PBS，还是MES，还是盐酸-咪唑缓冲溶液？第二步修饰抗体使用的缓冲溶液是PBS吗？
赞一下 回复此楼
莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
13楼2012-12-02 22:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-02 20:07:44
需要用缓冲液。
至于pH用多少要看你的实验。
如果一般链接反应大家做的实验有两种，一种是一锅法，直接加入EDC/NHS，溶液中的带氨基和带羧基的化合物直接活化反应，这步要避免使用带氨基或羟基的缓冲液，一般pH在 ...

14楼2012-12-02 22:10:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

onlycwt onlycwt
15楼2012-12-04 20:22:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-04 20:22:08
只要避免使用带氨基和羟基的。MES或1-甲基咪唑-HCl Buffer都可以。我用的后者。
第二步连接倒是感觉均可。用PBS或Tris-HCl都可以。
...

上次试了MES buffer不太行，请问咪唑缓冲溶液的浓度用多少呢？
赞一下 回复此楼
莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
16楼2012-12-09 18:41:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-04 20:22:08
只要避免使用带氨基和羟基的。MES或1-甲基咪唑-HCl Buffer都可以。我用的后者。
第二步连接倒是感觉均可。用PBS或Tris-HCl都可以。
...

对啦，这位大侠，是不是只能用1-甲基咪唑不能用咪唑配缓冲溶液呢？因为咪唑貌似带胺基。
赞一下 回复此楼
莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
17楼2012-12-09 20:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)
本帖内容被屏蔽
18楼2012-12-10 11:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

onlycwt
19楼2012-12-10 11:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
19楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-10 11:21:30
0.1 M 1-甲基咪唑...

太谢谢啦~我好多问题啊，还有，你用的是浸泡法还是滴涂法修饰抗体呢？
赞一下 回复此楼
莫听穿林打叶声，何妨吟啸且徐行。
20楼2012-12-18 16:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 onlycwt 的主题更新
252/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭