24小时热门版块排行榜    

查看: 4801  |  回复: 24

onlycwt

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
10楼: Originally posted by sailorlanyu at 2012-11-30 10:42:46
不怕,氮气吹不会把硫醇吹坏。EDC/NHS是要现配的。然后体系下,处理金电极的时候,不要加热到80度在硫酸/双氧水中超声。我们实验室就弄废过电极。泡着超声就好,别加热...

请问EDC/NHS溶液直接用水配还是用缓冲溶液呢,pH是多少比较好啊?我看有人用0.1M MES pH 6缓冲溶液,昨天我试了PBS pH 6的缓冲溶液活化效果不好。
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
11楼2012-11-30 11:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)

本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

12楼2012-12-02 20:07:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-02 20:07:44
需要用缓冲液。
至于pH用多少要看你的实验。
如果一般链接反应大家做的实验有两种,一种是一锅法,直接加入EDC/NHS,溶液中的带氨基和带羧基的化合物直接活化反应,这步要避免使用带氨基或羟基的缓冲液,一般pH在 ...

太感谢了,你一言顶我看好多文献总结。
我的是分两步反应的,先活化,再滴涂抗体。
请问第一步活化的缓冲剂有要求吗?用PBS,还是MES,还是盐酸-咪唑缓冲溶液?第二步修饰抗体使用的缓冲溶液是PBS吗?
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
13楼2012-12-02 22:08:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-02 20:07:44
需要用缓冲液。
至于pH用多少要看你的实验。
如果一般链接反应大家做的实验有两种,一种是一锅法,直接加入EDC/NHS,溶液中的带氨基和带羧基的化合物直接活化反应,这步要避免使用带氨基或羟基的缓冲液,一般pH在 ...

14楼2012-12-02 22:10:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)

本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

15楼2012-12-04 20:22:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-04 20:22:08
只要避免使用带氨基和羟基的。MES或1-甲基咪唑-HCl Buffer都可以。我用的后者。
第二步连接倒是感觉均可。用PBS或Tris-HCl都可以。
...

上次试了MES buffer不太行,请问咪唑缓冲溶液的浓度用多少呢?
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
16楼2012-12-09 18:41:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-04 20:22:08
只要避免使用带氨基和羟基的。MES或1-甲基咪唑-HCl Buffer都可以。我用的后者。
第二步连接倒是感觉均可。用PBS或Tris-HCl都可以。
...

对啦,这位大侠,是不是只能用1-甲基咪唑不能用咪唑配缓冲溶液呢?因为咪唑貌似带胺基。
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
17楼2012-12-09 20:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)

本帖内容被屏蔽

18楼2012-12-10 11:20:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天堂方向

禁虫 (文坛精英)

本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

19楼2012-12-10 11:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlycwt

铜虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
19楼: Originally posted by 天堂方向 at 2012-12-10 11:21:30
0.1 M 1-甲基咪唑...

太谢谢啦~我好多问题啊,还有,你用的是浸泡法还是滴涂法修饰抗体呢?
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
20楼2012-12-18 16:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 onlycwt 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 5/250 2026-08-24 21:51 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 我面上完蛋了 +9 且听虎啸 2026-08-20 10/500 2026-08-24 20:08 by 苦寒来香
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 什么时候开奖? +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见