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EDC/NHS活化金电极-硫醇后抗体固定不上
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最近在做生物传感器，按照如下步骤进行，但不知为什么抗体修饰不上去，请大侠帮我看看哪里有问题： 1、预处理金电极：化学抛光+电化学抛光 2、10毫摩 11-巯基十一烷酸乙醇溶液中避光浸泡3小时 3、75mM/15mM EDC/NHS水溶液浸泡1小时 4、电极自然晾干后滴加20uL 0.5mg/ml BSA水溶液，封装好在37°下反应1小时或4°下12小时（暂时用便宜的BSA代替抗体，看能不能修饰上） 5、将电极轻轻浸入双蒸水1分钟，取出后测试 -------------------------------------------------------------------- 不知道为什么就是不能修饰上去，EDC/NHS 活化那步电阻变小很多，跟文献相符，但不知带是否活化成功。 请帮忙看看哪里出了问题  |
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送鲜花一朵
13楼2012-12-02 22:08:25
2楼2012-11-27 20:55:17
Jackcd12
至尊木虫 (知名作家)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
onlycwt: 金币+5 2012-11-27 21:19:18
感谢参与，应助指数 +1
onlycwt: 金币+5 2012-11-27 21:19:18
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硫醇在Au表面的自组装方法虽已使用20年了，看似简单，但要获得满意的单分子膜却不是想象的那么容易。这个自组装过程中最关键的要素是保证Au表面的干净（无污染），其它的都很简单。因此，你如果是Au棒（不是Au薄膜）电极，出来起来就大胆些，采用强氧化(浓H2SO4+H2O2, 80C, 超声5-10min)，水清洗后，乙醇洗，马上放入硫醇中，尽量避免Au与污浊的空气接触，组装时间过夜更好。 不要忙于下一步，首先应该检测自组装效果，最好用铁氰化钾的CV法（阻抗谱）测试，可以后，表面这种预处理方法有效，以后采用。 然后，再重复一次，或几次，再往下走。 |
3楼2012-11-27 21:03:59
4楼2012-11-27 21:23:42