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蹦跶的奶牛

新虫 (初入文坛)

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[求助] western blot 转膜切胶后胶变弯曲变长是什么原因？

求助！！我在做western转膜的时候想把胶切一下，结果胶切两下了后有两条较窄的胶就变弯变长了，我做三明治放膜都不能将其完全覆盖，到底是什么原因？不知道是不是胶切得太细了？以前做的时候没有出现过这种情况，就是这两回做就这样了，很奇怪。

还有转膜后有一个膜没有marker 而且还干掉了。我转膜时间90分钟，300mA。是什么原因？蛋白是不是就测不出来了？

希望各位高手帮忙解答一下~

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1楼 2012-11-27 17:25:07

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 2011加油 at 2012-11-27 19:22:32
胶比较干时，会变卷，但不会变长啊，再用点电转液润一润，再做三明治。没有marker，你可以看看印到下面滤纸没？有没有转过了。也可以将胶进行考染，看看有没有蛋白条带残留没转过去。可以试着做完后续实验，看看结果 ...

谢谢。不过没有印到下面的滤纸，只是膜变干了。今天孵了抗体，果然什么都没有。。。又重做了，不知道明天结果怎么样呢。