应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot 转膜切胶后胶变弯曲变长是什么原因？
101/1返回列表
查看: 3512  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蹦跶的奶牛

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 转膜切胶后胶变弯曲变长是什么原因？

求助！！我在做western转膜的时候想把胶切一下，结果胶切两下了后有两条较窄的胶就变弯变长了，我做三明治放膜都不能将其完全覆盖，到底是什么原因？不知道是不是胶切得太细了？以前做的时候没有出现过这种情况，就是这两回做就这样了，很奇怪。
还有转膜后有一个膜没有marker 而且还干掉了。我转膜时间90分钟，300mA。是什么原因？蛋白是不是就测不出来了？希望各位高手帮忙解答一下~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-11-27 17:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011加油

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-28 13:45:21
胶比较干时，会变卷，但不会变长啊，再用点电转液润一润，再做三明治。没有marker，你可以看看印到下面滤纸没？有没有转过了。也可以将胶进行考染，看看有没有蛋白条带残留没转过去。可以试着做完后续实验，看看结果再说吧
赞一下(1人) 回复此楼
每天都是新开始，2011，要好好努力！
2楼2012-11-27 19:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小技术官

木虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 应助指数-1 2012-11-28 13:45:30
蹦跶的奶牛~~ 再让你蹦跶 实验不好做了吧
赞一下 回复此楼
生活是一面镜子，要笑着面对！
3楼2012-11-27 23:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lishg1985

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种情况下，你可以转完膜后用丽春红染色，然后再参照分子量剪膜，这样就可以达到你想要的结果，祝实验顺利~
赞一下 回复此楼
4楼2012-11-28 08:25:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶稍微变大一点是正常的，因为转膜用的buffer和胶的buffer是不一样的。一般可以把膜弄的稍稍大一点就不会出现转丢的问题啦。
赞一下 回复此楼
5楼2012-11-28 08:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蹦跶的奶牛

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2011加油 at 2012-11-27 19:22:32
胶比较干时，会变卷，但不会变长啊，再用点电转液润一润，再做三明治。没有marker，你可以看看印到下面滤纸没？有没有转过了。也可以将胶进行考染，看看有没有蛋白条带残留没转过去。可以试着做完后续实验，看看结果 ...

谢谢。不过没有印到下面的滤纸，只是膜变干了。今天孵了抗体，果然什么都没有。。。又重做了，不知道明天结果怎么样呢。
赞一下 回复此楼
6楼2012-11-28 14:28:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蹦跶的奶牛

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-28 08:27:56
胶稍微变大一点是正常的，因为转膜用的buffer和胶的buffer是不一样的。一般可以把膜弄的稍稍大一点就不会出现转丢的问题啦。

每次也都要大一些。可能我切的胶实在太小太细了，放滤纸赶气泡的时候膜和胶就错位了。
赞一下 回复此楼
7楼2012-11-28 14:30:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蹦跶的奶牛

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lishg1985 at 2012-11-28 08:25:51
这种情况下，你可以转完膜后用丽春红染色，然后再参照分子量剪膜，这样就可以达到你想要的结果，祝实验顺利~

意思是说我可以先整片胶转膜再裁开就好了吗？
赞一下 回复此楼
8楼2012-11-28 14:31:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2011加油

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 蹦跶的奶牛 at 2012-11-28 14:28:56
谢谢。不过没有印到下面的滤纸，只是膜变干了。今天孵了抗体，果然什么都没有。。。又重做了，不知道明天结果怎么样呢。...

PVDF膜最好不能干，还是多注意转膜，排除一些影响，再试试，好运！
赞一下 回复此楼
每天都是新开始，2011，要好好努力！
9楼2012-11-28 17:32:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aprils1988

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得是要把胶和pvdf膜都放在转膜液里平衡一下，我也是经常切完胶发现胶变卷了，有点不平，有一边会伸长
赞一下 回复此楼
10楼2013-07-29 20:37:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蹦跶的奶牛 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +5 瞬息宇宙 2026-09-01 11/550 2026-09-02 14:15 by simwe390
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭