9楼: Originally posted by 半生一梦 at 2012-11-27 19:20:59
是不是你T载体问题啊 我们这边PMD18-T直接买的试剂盒 你要不要重新买个试剂盒儿试试。。。
还有会不会保存菌种的时候哪边操作不当呢 甘油的比例啊神马的。。

10楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2012-11-28 10:02:42
划过线，提完了还是特别淡的质粒...

12楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2012-11-28 10:06:18
请问各位，如果之前的AMP按照1:1000加，后来转变为1:100加，这对保的菌种有什么影响？

14楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-11-28 14:07:07
你这是加大了抗生素的浓度啊
关键是你加了AMP后，摇菌长出来了吗？
一般抗生素是看工作浓度的，AMP的工作浓度是100微克/ml,配置成100mg/ml，然后按1:1000的加的啊...

16楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-28 14:43:44
一般提质粒是用摇的新鲜的菌液来提吧。。。楼主直接用质粒酶切然后回收片段如果亮度不是很亮，建议你以提出来的质粒为模板PCR，这样既节省质粒，P出来的条带也很亮，适合于胶回收。。。

18楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-28 17:03:27
1. 甘油的比例多少？太多了菌株反而不稳定
2. 感受态效率如何？我试过一段时间保存的菌株都失活，虫友们的建议是可能感受态活性低导致的。
3. 摇菌后菌液浓不浓？建议先鉴定一下看看是不是还是你要的那管菌，再提 ...

18楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-28 17:03:27
1. 甘油的比例多少？太多了菌株反而不稳定
2. 感受态效率如何？我试过一段时间保存的菌株都失活，虫友们的建议是可能感受态活性低导致的。
3. 摇菌后菌液浓不浓？建议先鉴定一下看看是不是还是你要的那管菌，再提 ...