【答案】应助回帖

20楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2012-11-29 11:10:20
导师让我把三个甘油菌再划线 pcr 然后阳性的再划再pcr 多次克隆后直到挑出阳性菌落，问题是是感染了杂菌吗，这样能挑出来吗？...

21楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-29 11:23:28
划平板是可以分出单菌落的。等有阳性克隆的时候，再提取质粒，鉴定后还可以继续转化。如果只是杂菌，提取质粒的时候质粒相对是比较纯的...

23楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-30 15:02:51
你有尝试用新的试剂盒，或者新的溶液，甚至是让你的同学帮忙提一下吗？
因为如果鉴定是阳性，一般不会提不出来的，另外你用的是什么方法提取的？

25楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-30 15:18:21
你有送测序吗？既然都这样了，不如送测序看看能不能测出你的目的基因，可能不需要测全长，就测一个反应看看。
另外你之前有没有剩下的质粒？稀释过都可以的。测序公司有时候会为客户保存样品一个月的，看看能不能找 ...

27楼: Originally posted by semitaoist at 2013-05-06 14:04:27
我们实验室现在也遇到这种情况了，氨苄抗性的质粒提得很淡，卡纳抗性的质粒没有问题，不知道如何破解。

10楼: Originally posted by 囧囧俏 at 2012-11-28 10:02:42
划过线，提完了还是特别淡的质粒...