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qPCR空白有荧光信号，无法去除
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最近做一种新发现的细菌的16S qPCR实验，用的SYBR Green I 荧光嵌合法，空白都有扩增，一般空白Ct值在30左右，最好记录是34，但一直达不到35以后，貌似还有引物二聚体情况，目的片段约200bp。已经做过很多次，换过药品和引物，尽量保持实验环境无菌，还是无法避免，同样条件做别的菌的就没问题。请高手指点如何改进，不胜感激！图1中红色为标准品溶解曲线，蓝色绿色为阴性对照溶解曲线，阴性对照Ct值分别为32.9和30.5；图2为另一相同实验的结果，阴性对照Ct值分别为29.7和29.0。 1.JPG  2.JPG |
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2楼2012-11-27 15:26:36
andywang6137
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3楼2012-11-27 16:07:20
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