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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒提取
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

[交流] 质粒提取

最近在质粒抽提的时候遇到一个头痛的问题，质粒是真核质粒，抽出来浓度1000ug/ml左右，A260/A280=1.85左右，但是跑琼脂糖凝胶电泳时，却没有条带或条带很暗。连续好几个质粒都遇到这个问题了，请问大侠们这是怎么回事啊！
另外：新抽提的原核质粒在相同浓度下，也没有以前抽提的亮度大。

[ Last edited by aofeng860308 on 2012-11-27 at 18:43 ]
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czdaeq

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1楼 2012-11-26 15:43:29
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by czdaeq at 2012-11-26 22:16:46
1、预热EB；2、烘干乙醇（貌似Wash Buffer）；3、那个柱子的吸附DNA效率不高的话，可以反复过柱子次（若是有核酸定量仪，测测滤出的废液看看与之前相比核酸量有没有显著下降）
暂时就想到这些。

这个应该是浓度不高才要进行的操作吧，我现在是浓度纯度都挺好，就是跑电泳没有条带或条带很暗。
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9楼2012-11-26 23:01:58
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)
★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
把所有东西全部换掉再抽
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2楼2012-11-26 19:22:54
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)
★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
提取用的试剂可能不在最佳状态了
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3楼2012-11-26 19:30:10
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-26 19:22:54
把所有东西全部换掉再抽

新的试剂盒抽出来的也一样啊
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4楼2012-11-26 19:59:39
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