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质粒提取
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aofeng860308
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[交流]
质粒提取
最近在质粒抽提的时候遇到一个头痛的问题,质粒是真核质粒,抽出来浓度1000ug/ml左右,A260/A280=1.85左右,但是跑琼脂糖凝胶电泳时,却没有条带或条带很暗。连续好几个质粒都遇到这个问题了,请问大侠们这是怎么回事啊!
另外:新抽提的原核质粒在相同浓度下,也没有以前抽提的亮度大。
[
Last edited by aofeng860308 on 2012-11-27 at 18:43
]
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czdaeq
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2012-11-26 15:43:29
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aofeng860308
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7楼
:
Originally posted by
czdaeq
at 2012-11-26 22:16:46
1、预热EB;2、烘干乙醇(貌似Wash Buffer);3、那个柱子的吸附DNA效率不高的话,可以反复过柱子次(若是有核酸定量仪,测测滤出的废液看看与之前相比核酸量有没有显著下降)
暂时就想到这些。
这个应该是浓度不高才要进行的操作吧,我现在是浓度纯度都挺好,就是跑电泳没有条带或条带很暗。
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9楼
2012-11-26 23:01:58
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gyesang
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2012-11-26 19:22:54
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aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
提取用的试剂可能不在最佳状态了
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2012-11-26 19:30:10
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aofeng860308
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2楼
:
Originally posted by
gyesang
at 2012-11-26 19:22:54
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新的试剂盒抽出来的也一样啊
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4楼
2012-11-26 19:59:39
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