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aofeng860308

木虫 (正式写手)


[交流] 质粒提取

最近在质粒抽提的时候遇到一个头痛的问题,质粒是真核质粒,抽出来浓度1000ug/ml左右,A260/A280=1.85左右,但是跑琼脂糖凝胶电泳时,却没有条带或条带很暗。连续好几个质粒都遇到这个问题了,请问大侠们这是怎么回事啊!
另外:新抽提的原核质粒在相同浓度下,也没有以前抽提的亮度大。

[ Last edited by aofeng860308 on 2012-11-27 at 18:43 ]
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aofeng860308

木虫 (正式写手)


引用回帖:
10楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-11-26 23:45:32
1000ug/ul ?那是相当的高啊。。。一般原核质粒不都是才100ng/ul左右,看到的条带已经相当明显。。。可能是染色的EB太旧了效果不好?或者实验环境中有DNase污染?你可以试试把染过的胶放置不同时间再照UV看看是否条 ...

打错了,应该是1000ug/ml,但是也是普通原核质粒的10倍左右。染色的和DNase酶污染应该都没有问题,我同一批跑的其他样品都是正常的。
13楼2012-11-27 22:53:25
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aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
把所有东西全部换掉再抽
2楼2012-11-26 19:22:54
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)



aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
提取用的试剂可能不在最佳状态了
3楼2012-11-26 19:30:10
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aofeng860308

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-26 19:22:54
把所有东西全部换掉再抽

新的试剂盒抽出来的也一样啊
4楼2012-11-26 19:59:39
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