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aofeng860308

木虫 (正式写手)

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[交流] 质粒提取

最近在质粒抽提的时候遇到一个头痛的问题，质粒是真核质粒，抽出来浓度1000ug/ml左右，A260/A280=1.85左右，但是跑琼脂糖凝胶电泳时，却没有条带或条带很暗。连续好几个质粒都遇到这个问题了，请问大侠们这是怎么回事啊！
另外：新抽提的原核质粒在相同浓度下，也没有以前抽提的亮度大。

[ Last edited by aofeng860308 on 2012-11-27 at 18:43 ]

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1楼 2012-11-26 15:43:29

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aofeng860308

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

10楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-11-26 23:45:32
1000ug/ul ？那是相当的高啊。。。一般原核质粒不都是才100ng/ul左右，看到的条带已经相当明显。。。可能是染色的EB太旧了效果不好？或者实验环境中有DNase污染？你可以试试把染过的胶放置不同时间再照UV看看是否条 ...

打错了，应该是1000ug/ml，但是也是普通原核质粒的10倍左右。染色的和DNase酶污染应该都没有问题，我同一批跑的其他样品都是正常的。