应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » BCA检测蛋白浓度负值怎么回事
141/2返回列表12下一页
查看: 7533  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

happyzxj718

新虫 (初入文坛)

[求助] BCA检测蛋白浓度负值怎么回事

虫虫们，最近用BCA试剂盒检测溶液内蛋白含量，蛋白浓度应该很低，计算后浓度是负数呢，什么意思呀，求指点。急呀。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
I LIKE MY WORK
1楼 2012-11-25 21:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-11-26 07:10:47
你是否做了样品buffer的对照？buffer里有些成分可能造成吸光值下降。如果buffer的负值不是很大的情况下，你可以直接测定含有同样量的buffer下的吸光值（假定为负），然后用测定样品的吸光值扣除这个负对照，然后再根据标准曲线计算。或者，你也可以把做标准曲线的BSA的样品也加入同样量的buffer。祝你好运！
赞一下 回复此楼
2楼2012-11-26 05:37:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你用的标准曲线或者参比不太对哦……要是你参比用错了的话，比如参比有挺高的吸收的话，会拉低你的样品吸光度，算出来就可能是负值
赞一下 回复此楼
3楼2012-11-26 08:18:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyzxj718

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-26 05:37:02
你是否做了样品buffer的对照？buffer里有些成分可能造成吸光值下降。如果buffer的负值不是很大的情况下，你可以直接测定含有同样量的buffer下的吸光值（假定为负），然后用测定样品的吸光值扣除这个负对照，然后再根 ...

谢谢你的回复。我用的碧云天的试剂盒，按照说明书步骤来做的，标曲R2在0.96左右。蛋白浓度低会不会出现负值这种情况呢
赞一下 回复此楼
I LIKE MY WORK
4楼2012-11-26 19:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyzxj718

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-11-26 08:18:00
是不是你用的标准曲线或者参比不太对哦……要是你参比用错了的话，比如参比有挺高的吸收的话，会拉低你的样品吸光度，算出来就可能是负值

你好，谢谢你的回复。我实验的标准曲线R2在0.96左右。蛋白浓度很低，最低的可能小于1ug/ml.会不会不能检测到呢
赞一下 回复此楼
I LIKE MY WORK
5楼2012-11-26 19:25:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by happyzxj718 at 2012-11-26 19:22:19
谢谢你的回复。我用的碧云天的试剂盒，按照说明书步骤来做的，标曲R2在0.96左右。蛋白浓度低会不会出现负值这种情况呢...

一般做标准曲线是用BSA溶解在水里的，你蛋白样品的buffer往往有蔗糖啊或者其他还原性物质来保护蛋白，BCA对这些比其他方法要敏感。我不知道具体你的样品是溶在什么buffer里的，所以不好定论。但是你一定要检测一下样品BUFFER在检测方法下是否为0，这是所有定量蛋白浓度方法所必需的。
赞一下 回复此楼
6楼2012-11-27 07:02:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lynet

银虫 (初入文坛)
不是调零没调好呀？我之前也是试过这样，再重新调一次零，就没负值了。
赞一下 回复此楼
7楼2012-11-27 09:03:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljsh

铁杆木虫 (著名写手)
蛋白浓度低于试剂盒检测下限
赞一下 回复此楼
8楼2012-11-27 11:29:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyzxj718

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-27 07:02:47
一般做标准曲线是用BSA溶解在水里的，你蛋白样品的buffer往往有蔗糖啊或者其他还原性物质来保护蛋白，BCA对这些比其他方法要敏感。我不知道具体你的样品是溶在什么buffer里的，所以不好定论。但是你一定要检测一下 ...

万分感激
回复此楼
I LIKE MY WORK
9楼2012-11-27 21:49:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happyzxj718

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lynet at 2012-11-27 09:03:35
不是调零没调好呀？我之前也是试过这样，再重新调一次零，就没负值了。

谢啦，我重新调零
回复此楼
I LIKE MY WORK
10楼2012-11-27 21:50:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 happyzxj718 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +12 基诺咪客 2026-08-17 16/800 2026-08-19 22:04 by kk 的小木虫
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭