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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

[求助] 逆向蒸发法制备脂质体 已有1人参与

怎样用逆向蒸发法制备脂质体?步骤有哪些?应该注意哪些问题?我最近做但是怎么做都没有成功?郁闷!求各位大侠帮忙!
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bwshanxi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-20 22:12:11
y药用1/5稀释的PBS(pH5)溶解成10mg/ml的溶液,磷脂60mg,胆固醇15mg,氯仿溶解,油水比3:1,探头超声乳化(超5s,停3s,4o次,200W),成乳后蒸发除去溶剂,再用1/5稀释的PBS(pH5)水化约1小时。制得的脂质体采用超滤法测定包封率。
本人品德好,勤奋好学!勤奋沉淀优秀,理想造就人生!!
2楼2012-11-20 13:19:23
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 君临sky下 at 2012-11-21 12:43:06
一定比例的磷脂胆固醇,加有机溶剂溶解(我用的乙醚),加入水相,油水3:1。如果药物是水溶性的,直接溶到水相中,药物脂溶性的就和磷脂胆固醇一块溶解在有机相中。超声振摇,混匀。旋转蒸发挥去有机溶剂,形成反胶 ...

我不用探头超声来整粒,而是用过滤来代替可以吗?
7楼2012-11-21 20:42:57
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bwshanxi at 2012-11-20 13:19:23
y药用1/5稀释的PBS(pH5)溶解成10mg/ml的溶液,磷脂60mg,胆固醇15mg,氯仿溶解,油水比3:1,探头超声乳化(超5s,停3s,4o次,200W),成乳后蒸发除去溶剂,再用1/5稀释的PBS(pH5)水化约1小时。制得的脂质体采用超滤法 ...

哦,太感谢了。我想问一下蒸发到什么程度说明有机溶剂除干净了,因为是减压蒸发,我没看到有氯仿流出,可能都到空气中了吧。什么时候是水化的时刻呢?水化时加多少PBS缓冲液?2ml?
3楼2012-11-20 21:54:57
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君临sky下

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-21 21:24:30
一定比例的磷脂胆固醇,加有机溶剂溶解(我用的乙醚),加入水相,油水3:1。如果药物是水溶性的,直接溶到水相中,药物脂溶性的就和磷脂胆固醇一块溶解在有机相中。超声振摇,混匀。旋转蒸发挥去有机溶剂,形成反胶束(旋蒸不好也有可能得到的是乳)。水化。探头超声。得到脂质体。
Liposome/Fighting!
4楼2012-11-21 12:43:06
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-21 21:24:36
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰激凌的眼泪 at 2012-11-20 21:54:57
哦,太感谢了。我想问一下蒸发到什么程度说明有机溶剂除干净了,因为是减压蒸发,我没看到有氯仿流出,可能都到空气中了吧。什么时候是水化的时刻呢?水化时加多少PBS缓冲液?2ml?...

老师告诉我 氯仿是否除尽闻闻味道。。。
但是我觉得还是少闻 这个东西总闻不太好
我制备的量比较小 加入的氯仿量也小 但是会在接受瓶的瓶底上有一些
春有百花秋有月,夏有凉风冬有雪,若无闲事挂心头,便是人间好时节
5楼2012-11-21 14:21:12
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bwshanxi at 2012-11-20 13:19:23
y药用1/5稀释的PBS(pH5)溶解成10mg/ml的溶液,磷脂60mg,胆固醇15mg,氯仿溶解,油水比3:1,探头超声乳化(超5s,停3s,4o次,200W),成乳后蒸发除去溶剂,再用1/5稀释的PBS(pH5)水化约1小时。制得的脂质体采用超滤法 ...

我今天试了探头超声,但是短时超声根本就不能形成乳剂,我超声了很久才形成类似牛奶的乳剂,请问超声时间长对后面的制备有什么影响吗?还有最后的水化时用什么水化,是超声还是继续用减压旋转蒸发?我今天水化了近五个小时还有一些白色的小粒子。后来我就直接过滤了。这样行吗?为什么我的水化了那么久还没水化好呢?是我制备的量多吗?我就用30ml的氯仿和10ml的水来制备的,这个量是否大了?
6楼2012-11-21 20:42:11
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by 君临sky下 at 2012-11-21 12:43:06
一定比例的磷脂胆固醇,加有机溶剂溶解(我用的乙醚),加入水相,油水3:1。如果药物是水溶性的,直接溶到水相中,药物脂溶性的就和磷脂胆固醇一块溶解在有机相中。超声振摇,混匀。旋转蒸发挥去有机溶剂,形成反胶 ...

还有一个疑问,旋转不好能形成乳是怎么回事?乳和胶束分别是什么样的啊?乳是能流动的,而胶束是紧紧贴在瓶壁上的,这样理解对吗?
8楼2012-11-21 20:45:19
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by tongliwoai at 2012-11-21 14:21:12
老师告诉我 氯仿是否除尽闻闻味道。。。
但是我觉得还是少闻 这个东西总闻不太好
我制备的量比较小 加入的氯仿量也小 但是会在接受瓶的瓶底上有一些...

哦,这样啊,谢啦!
9楼2012-11-21 20:45:52
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君临sky下

金虫 (小有名气)

★
xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-22 11:09:41
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冰激凌的眼泪 at 2012-11-21 20:42:57
我不用探头超声来整粒,而是用过滤来代替可以吗?...

貌似不行吧,超滤我一般用0.8微的膜,但超滤液是外水相,脂质体过不去的。要得到粒径适合的脂质体就得挤出或者微射流。
Liposome/Fighting!
10楼2012-11-22 09:24:51
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