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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 逆向蒸发法制备脂质体
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

[求助] 逆向蒸发法制备脂质体已有1人参与

怎样用逆向蒸发法制备脂质体？步骤有哪些？应该注意哪些问题？我最近做但是怎么做都没有成功？郁闷！求各位大侠帮忙！
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1楼2012-11-20 12:34:36
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bwshanxi

至尊木虫 (文坛精英)

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-20 22:12:11
y药用1/5稀释的PBS(pH5)溶解成10mg/ml的溶液，磷脂60mg，胆固醇15mg，氯仿溶解，油水比3:1，探头超声乳化(超5s，停3s，4o次，200W)，成乳后蒸发除去溶剂，再用1/5稀释的PBS(pH5)水化约1小时。制得的脂质体采用超滤法测定包封率。
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本人品德好,勤奋好学!勤奋沉淀优秀,理想造就人生!!
2楼2012-11-20 13:19:23
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 君临sky下 at 2012-11-21 12:43:06
一定比例的磷脂胆固醇，加有机溶剂溶解（我用的乙醚），加入水相，油水3:1。如果药物是水溶性的，直接溶到水相中，药物脂溶性的就和磷脂胆固醇一块溶解在有机相中。超声振摇，混匀。旋转蒸发挥去有机溶剂，形成反胶 ...

我不用探头超声来整粒，而是用过滤来代替可以吗？
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7楼2012-11-21 20:42:57
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by bwshanxi at 2012-11-20 13:19:23
y药用1/5稀释的PBS(pH5)溶解成10mg/ml的溶液，磷脂60mg，胆固醇15mg，氯仿溶解，油水比3:1，探头超声乳化(超5s，停3s，4o次，200W)，成乳后蒸发除去溶剂，再用1/5稀释的PBS(pH5)水化约1小时。制得的脂质体采用超滤法 ...

哦，太感谢了。我想问一下蒸发到什么程度说明有机溶剂除干净了，因为是减压蒸发，我没看到有氯仿流出，可能都到空气中了吧。什么时候是水化的时刻呢？水化时加多少PBS缓冲液？2ml?
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3楼2012-11-20 21:54:57
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君临sky下

金虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-21 21:24:30
一定比例的磷脂胆固醇，加有机溶剂溶解（我用的乙醚），加入水相，油水3:1。如果药物是水溶性的，直接溶到水相中，药物脂溶性的就和磷脂胆固醇一块溶解在有机相中。超声振摇，混匀。旋转蒸发挥去有机溶剂，形成反胶束（旋蒸不好也有可能得到的是乳）。水化。探头超声。得到脂质体。
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Liposome/Fighting!
4楼2012-11-21 12:43:06
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-21 21:24:36
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3楼: Originally posted by 冰激凌的眼泪 at 2012-11-20 21:54:57
哦，太感谢了。我想问一下蒸发到什么程度说明有机溶剂除干净了，因为是减压蒸发，我没看到有氯仿流出，可能都到空气中了吧。什么时候是水化的时刻呢？水化时加多少PBS缓冲液？2ml?...

老师告诉我 氯仿是否除尽闻闻味道。。。
但是我觉得还是少闻 这个东西总闻不太好
我制备的量比较小 加入的氯仿量也小 但是会在接受瓶的瓶底上有一些
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春有百花秋有月，夏有凉风冬有雪，若无闲事挂心头，便是人间好时节
5楼2012-11-21 14:21:12
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by bwshanxi at 2012-11-20 13:19:23
y药用1/5稀释的PBS(pH5)溶解成10mg/ml的溶液，磷脂60mg，胆固醇15mg，氯仿溶解，油水比3:1，探头超声乳化(超5s，停3s，4o次，200W)，成乳后蒸发除去溶剂，再用1/5稀释的PBS(pH5)水化约1小时。制得的脂质体采用超滤法 ...

我今天试了探头超声，但是短时超声根本就不能形成乳剂，我超声了很久才形成类似牛奶的乳剂，请问超声时间长对后面的制备有什么影响吗？还有最后的水化时用什么水化，是超声还是继续用减压旋转蒸发？我今天水化了近五个小时还有一些白色的小粒子。后来我就直接过滤了。这样行吗?为什么我的水化了那么久还没水化好呢？是我制备的量多吗？我就用30ml的氯仿和10ml的水来制备的，这个量是否大了？
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6楼2012-11-21 20:42:11
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 君临sky下 at 2012-11-21 12:43:06
一定比例的磷脂胆固醇，加有机溶剂溶解（我用的乙醚），加入水相，油水3:1。如果药物是水溶性的，直接溶到水相中，药物脂溶性的就和磷脂胆固醇一块溶解在有机相中。超声振摇，混匀。旋转蒸发挥去有机溶剂，形成反胶 ...

还有一个疑问，旋转不好能形成乳是怎么回事？乳和胶束分别是什么样的啊？乳是能流动的，而胶束是紧紧贴在瓶壁上的，这样理解对吗？
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8楼2012-11-21 20:45:19
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by tongliwoai at 2012-11-21 14:21:12
老师告诉我 氯仿是否除尽闻闻味道。。。
但是我觉得还是少闻 这个东西总闻不太好
我制备的量比较小 加入的氯仿量也小 但是会在接受瓶的瓶底上有一些...

哦，这样啊，谢啦！
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9楼2012-11-21 20:45:52
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君临sky下

金虫 (小有名气)
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xiaoxiao270: 金币+1 2012-11-22 11:09:41
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7楼: Originally posted by 冰激凌的眼泪 at 2012-11-21 20:42:57
我不用探头超声来整粒，而是用过滤来代替可以吗？...

貌似不行吧，超滤我一般用0.8微的膜，但超滤液是外水相，脂质体过不去的。要得到粒径适合的脂质体就得挤出或者微射流。
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Liposome/Fighting!
10楼2012-11-22 09:24:51
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