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海阔天空102

木虫 (正式写手)

[求助] 适配体 aptamer 与分析物相互作用相关

适配体aptamer 如何能有效的与分析物结合,例如VEGF165与VEGF165 aptamer 有效结合需要注意哪些条件?比如温度,ph,离子强度,  这与抗体与抗原的相互作用有什么主要区别?

如何让适配体高效结合分析物呢?
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海阔天空102

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangxiaohai at 2012-11-20 10:44:27
aptamer与靶标的结合条件,主要取决于aptamer的筛选条件。对于一些用得比较多的aptamer,有不少参考文献。当然,现在有的文献比较水,要注意杂志的档次和文章的作者。
抗原-抗体的结合有前带后带的说法,aptamer似 ...

很感谢,aptamer 与分析物结合前是不是一定要activation或是退火?还有注意离子强度,温度?ph值起什么作用呢? 多谢指点。固定化的aptamer 手臂是什么意思?是要加6个C吗
3楼2012-11-20 16:47:17
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yangxiaohai

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
海阔天空102: 金币+5, 博学EPI+1 2012-11-20 23:18:47
aptamer与靶标的结合条件,主要取决于aptamer的筛选条件。对于一些用得比较多的aptamer,有不少参考文献。当然,现在有的文献比较水,要注意杂志的档次和文章的作者。
抗原-抗体的结合有前带后带的说法,aptamer似乎没有。
aptamer与靶标的结合,与aptamer是否被固定有关。固定化的aptamer,一定要注意手臂的设计。
2楼2012-11-20 10:44:27
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xugehui

铁杆木虫 (著名写手)

general

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
海阔天空102: 金币+5 2012-11-20 23:18:55
个人感觉固定化的aptamer的手臂是为了降低位阻。。。aptamer在使用前变性是为了aptamer呈现链状而不是相互纠缠在一起。也可以说是为了增加aptamer与target的识别机会。至于离子强度,温度和pH值在一定程度上会影响aptamer的选择性和灵敏度,这个要靠实验优化,或者参考权威文献,个人觉得一般情况下和筛选这种aptamer的条件是类似的。
宇智波-鼬~美到极致是疯狂~
4楼2012-11-20 18:08:28
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海阔天空102

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xugehui at 2012-11-20 18:08:28
个人感觉固定化的aptamer的手臂是为了降低位阻。。。aptamer在使用前变性是为了aptamer呈现链状而不是相互纠缠在一起。也可以说是为了增加aptamer与target的识别机会。至于离子强度,温度和pH值在一定程度上会影响a ...

希望大家广泛留言提供宝贵意见,初次研究适配体与分析物相互作用,但就是抓不到,具体点正在用ATP的aptamer 捕获ATP,但是不知道哪个关键环节有问题,就是抓不到ATP!还请高手指点
5楼2012-11-21 19:38:24
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