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适配体 aptamer 与分析物相互作用相关
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适配体aptamer 如何能有效的与分析物结合，例如VEGF165与VEGF165 aptamer 有效结合需要注意哪些条件？比如温度，ph，离子强度， 这与抗体与抗原的相互作用有什么主要区别？ 如何让适配体高效结合分析物呢？ |
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6楼2012-11-27 08:51:34
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7楼2012-11-30 10:17:53
【答案】应助回帖
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海阔天空102: 金币+15, ★★★很有帮助 2012-12-03 23:06:24
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适配体aptamer 与分析物有效结合的有效结合取决于它们之间本身的亲和性（例如解离常数或结合常数）；以及所用的buffer 种类 pH 盐离子浓度等外部条件。 亲和性可以通过文献所报道的获得，像ATP与其DNA aptamer解离常数在微摩尔级，所以要想观察到明显的结合，ATP需要在毫摩尔级的浓度。VEGF与aptamer亲和性在100纳摩尔左右，VEGF的浓度可能要到微摩尔级了。此外，VEGF是蛋白质，需要防止其变性。 实验缓冲条件可以参考其原始文献，即楼上所提到的筛选条件。 如果aptamer是固定在表面上，可能还会在很大程度上减弱其与分析物的亲和性。影响的减弱在于连接臂的设计、在表面固定的密度等。 |
8楼2012-12-02 20:15:15
