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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

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[求助] 扩增基因CDS区域如何设计引物？

请问欲扩增基因CDS区域然后连接载体转染入细胞内表达，引物如何设计？我看到有人说上游引物在起始密码子前照抄20个左右，这是什么意思啊？

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1楼 2012-11-18 21:44:19

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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

16楼: Originally posted by yuguiyan at 2012-11-25 15:59:50
“把光标放到序列前端时，自动匹配的是上游引物，而这段序列刚好就是你的CDS区的前17到24个碱基的序列”，我观察到：这段序列与CDS区的前17到24个碱基的序列是互补的啊，不是一致的啊！跟您说的不一致啊...

哥们。。。你看一下PCR的原理就知道啦。。上游引物就是你的目的基因前面那17到25啦（不是互补）。下游引物即是与你的目的基因末端反向互补的序列啦。Genebank和FAST格式不都是一样的吗？哥们。。。你真的好好看一下PCR的原理。。。