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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
fddyn: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-11-18 10:30:16
引用回帖:
8楼: Originally posted by fddyn at 2012-11-17 23:42:58
6ng/ul 这么低啊,是指粗提产物就6ng/ul吗,纯化后的测浓度是8ng/ul左右啊...

我是指纯化后的浓度,上样也是5ul的话。粗提浓度要高些,大概在25ng/ul左右吧。
11楼2012-11-18 01:14:36
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fddyn: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢, 2012-11-18 10:30:53
将浓度高的样品等体积稀释,看条带亮度相类似的稀释倍数,应该是比较准确。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2012-11-18 10:24:15
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jl860822

金虫 (正式写手)


反相之后测一下灰度值就可以了,楼主这DNA提的很不错的,纯化的效果也不错,楼主是要构建DNA文库吗?
13楼2012-11-19 12:04:05
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fddyn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by jl860822 at 2012-11-19 12:04:05
反相之后测一下灰度值就可以了,楼主这DNA提的很不错的,纯化的效果也不错,楼主是要构建DNA文库吗?

,谢谢夸奖
不做dna文库,就做微生物遗传多样性
14楼2012-11-19 23:42:13
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375697868

新虫 (初入文坛)

你好!胶照相的里面有个浓度对比软件了,可以参考一下。另外,我看到你的Lambda DNA/Hind III Marker跑的比我的好的多,我想问下你胶浓度和电压分别是好多,跑了好长时间呢?非常感谢!
15楼2013-10-14 13:13:16
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fddyn

金虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 375697868 at 2013-10-14 13:13:16
你好!胶照相的里面有个浓度对比软件了,可以参考一下。另外,我看到你的Lambda DNA/Hind III Marker跑的比我的好的多,我想问下你胶浓度和电压分别是好多,跑了好长时间呢?非常感谢!

我们跑20kb的片段,一般用80v的电压,跑25min,胶浓度0.5-1%都试过,感觉差别不大,主要是后来要切胶纯化,0.5%的太软了不好切,又回1%的胶了
要是跑pcr的(300-500bp的,我们p的一般都这么大片段的),就110-120v的电压,20min,1%的胶
16楼2013-10-15 18:44:31
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

条带浓度大约是Maker浓度的五分之一
我给不了你宝马香车,锦衣玉食,但我会用一辈子去疼你,爱你,保护你
17楼2013-10-16 10:29:02
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