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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fddyn

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 新手求通过marker估计下dna浓度

用传统方法手提的土壤微生物dna，杂质含量太高测浓度的ND-1000分光光度计测出来不准，故想通过跑胶与marker比较估计个大概浓度，也好知道纯化的回收率，谢谢
Q1--Q5 均为qiagen胶回收试剂盒纯化后的样品，marker（M）在中间，1--8为粗提产物
样品上样量为 ：5ul
marker上样量为：5ul
marker用的是 Lambda DNA/Hind III Marker，上样6ul时 23130bp （最后那条）是238.4ng，9416bp（倒数第二条）是97.1ng

2012.11.09---.JPG
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1楼 2012-11-16 19:22:15
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fddyn

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
15楼: Originally posted by 375697868 at 2013-10-14 13:13:16
你好！胶照相的里面有个浓度对比软件了，可以参考一下。另外，我看到你的Lambda DNA/Hind III Marker跑的比我的好的多，我想问下你胶浓度和电压分别是好多，跑了好长时间呢？非常感谢！

我们跑20kb的片段，一般用80v的电压，跑25min，胶浓度0.5-1%都试过，感觉差别不大，主要是后来要切胶纯化，0.5%的太软了不好切，又回1%的胶了
要是跑pcr的（300-500bp的，我们p的一般都这么大片段的），就110-120v的电压，20min，1%的胶
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16楼2013-10-15 18:44:31
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fddyn

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
再补充点，跑的是0.5%的琼脂糖胶
为什么纯化后比纯化前看上去片段大呐
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2楼2012-11-16 19:24:10
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cicelyzh

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fddyn: 金币+3, ★有帮助 2012-11-17 23:47:00
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-19 13:59:23
marker9kb与23kb的带跑得不是很开，而且浓度明显比样品高。可以考虑少上点marker，电泳时间长一点再看。从目前的粗略估计，大概浓度在大约6ng/ul。
纯化前的样品杂质多，浓度较高，条带笑脸，电泳的表观分子量稍微偏小是很正常的。
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3楼2012-11-17 08:00:16
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elbo

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
貌似片段小于23kb，请问胶上面的标记是怎么弄的，谢谢。
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4楼2012-11-17 08:04:35
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