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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fddyn

版主

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[求助] 新手求通过marker估计下dna浓度

用传统方法手提的土壤微生物dna,杂质含量太高测浓度的ND-1000分光光度计测出来不准,故想通过跑胶与marker比较估计个大概浓度,也好知道纯化的回收率,谢谢
Q1--Q5 均为qiagen胶回收试剂盒纯化后的样品,marker(M)在中间,1--8为粗提产物
样品上样量为 :5ul
marker上样量为:5ul
marker用的是 Lambda DNA/Hind III Marker,上样6ul时 23130bp (最后那条)是238.4ng,9416bp(倒数第二条)是97.1ng

2012.11.09---.JPG
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zhaodahe

版主

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fddyn: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢, 2012-11-18 10:30:53
将浓度高的样品等体积稀释,看条带亮度相类似的稀释倍数,应该是比较准确。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
12楼2012-11-18 10:24:15
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fddyn

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

再补充点,跑的是0.5%的琼脂糖胶
为什么纯化后比纯化前看上去片段大呐
2楼2012-11-16 19:24:10
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cicelyzh

超级版主

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fddyn: 金币+3, 有帮助 2012-11-17 23:47:00
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-19 13:59:23
marker9kb与23kb的带跑得不是很开,而且浓度明显比样品高。可以考虑少上点marker,电泳时间长一点再看。从目前的粗略估计,大概浓度在大约6ng/ul。
纯化前的样品杂质多,浓度较高,条带笑脸,电泳的表观分子量稍微偏小是很正常的。
3楼2012-11-17 08:00:16
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elbo

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

貌似片段小于23kb,请问胶上面的标记是怎么弄的,谢谢。
4楼2012-11-17 08:04:35
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