24小时热门版块排行榜

返回列表

leannele

金虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 463.4
散金: 69
红花: 16
帖子: 285
在线: 75.5小时
虫号: 856606
注册: 2009-09-25
性别: MM
专业: 植物学

[交流] 关于用于q-PCR的RNA模板浓度测定已有2人参与

本人是做植物病毒病的。最近用q-PCR检测样本中病毒的表达量。提取RNA后测定浓度，然后取1微克总RNA做反转录，然后做q-PCR。
我的样本比较少，不能大量提取RNA，在RNA提出来后不可能用抽提法去除基因组DNA，只能使用公司的试剂盒。
困惑的是我应该是在取出基因组DNA前测定RNA的浓度还是去除之后测定，或者是在其前后都测定？因为加入的DNA酶是要根据RNA的浓度来计算的。
还请各位帮忙

回复此楼

» 猜你喜欢

SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有98人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展已经有0人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

1楼 2012-11-15 15:14:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zhoulubin

银虫 (小有名气)

应助: 26 (小学生)
金币: 687.8
帖子: 122
在线: 70.9小时
虫号: 1215331
注册: 2011-02-27
性别: GG
专业: 植物遗传学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

第一、建议你先跑电泳看看DNA残留情况，很多RNA提取试剂盒提不出DNA的；
第二、没必要纠结在上面时候测浓度，引物反转录说的1微克只是上限；
第三、如果你做Qpcr用的是dealt dealt Ct法，就没必要保证cDNA浓度一致，因为你有内参；
第四、如果是我，我会在反转录之后，再用cDNA跑个Act，电泳就知道大概各样品的浓度，好知道QPCR时稀释模板。