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juan_819

铁虫 (初入文坛)

[求助] 如何提取HMGR

请问:
      如何从植物中提取HMGR这个酶从而用以进行酶活测定?
     谢谢!
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juan_819

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2012-11-15 21:52:05
以前我是照这个方法做得
All enzymes assayed in this work were extracted from the
hairy roots with an extraction buffer of 50 mM Tris–HCl,
10 mM β-mercaptoethanol, 1% (w/v) polyvinylpyrrolidone
a ...

谢谢啊······你也是做得这个吗?
5楼2012-11-17 20:34:10
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

上次传的文章楼主用不到?
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-11-15 18:13:24
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juan_819

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-11-15 18:13:24
上次传的文章楼主用不到?

有用的。文献主要讲的是测定方法,但是文献中都是直接就用酶蛋白了,我们这边本身是想等酶转化出来测酶活,那样就可以用文献里的方法了,不过现在没还没成功转化出来,所以没有现成的酶,现在想要直接从植物里把它提出来先测下看看。
3楼2012-11-15 21:14:59
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前我是照这个方法做得
All enzymes assayed in this work were extracted from the
hairy roots with an extraction buffer of 50 mM Tris–HCl,
10 mM β-mercaptoethanol, 1% (w/v) polyvinylpyrrolidone
and pH7.5. The roots were ground in the extraction buffer
(1 g FW/mL) for 5 min with a pestle and mortar on ice,
followed by centrifugation at 14,000 rpm and 4°C for
30 min to obtain a solids-free extract. The protein content
was determined by the Bradford method using bovine
serum albumin as a standard.
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2012-11-15 21:52:05
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