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yaxing2009

银虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 880.3
散金: 24
帖子: 174
在线: 88.3小时
虫号: 922365
注册: 2009-12-07
性别: MM
专业: 药物分析

[求助] HPLC求助

请教各位：我现在检测的样品用乙腈和水为流动相，在进样之前样品在260nm处能检测到，同一波长处我乙腈和水作为流动相，保留时间在2min左右，接着我又通过降低乙腈比例来调整流动相极性，随着乙腈比例减小样品保留时间越来越大，当保留时间为10min时我停止摸索条件，用甲醇洗柱子，现在问题是我换了甲醇之后，立马有一个很大很尖的峰出现,而且峰型很好，请问这个峰有没有可能是我的样品峰啊，由于本人刚开始接触液相，还请各位前辈多多指教！谢谢！

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1楼 2012-11-14 16:43:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yumulin

金虫 (正式写手)

应助: 41 (小学生)
金币: 873
红花: 4
帖子: 305
在线: 55小时
虫号: 754165
注册: 2009-04-21
专业: 药物分析

【答案】应助回帖

★
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-01-27 00:08:41

引用回帖:

8楼: Originally posted by yaxing2009 at 2012-11-15 10:03:37
是用甲醇冲柱子时出现的峰，我最后确定的乙腈-水的比例为35:65，当水为70时，没有峰出现，乙腈比例我从90%一直试到30%，出峰时间从1左右变到10分多，乙腈30%时没有峰出现，为了确定这个峰是否为样品峰，我又配了一 ...

因该是你的样品峰，因为随着浓度的增大而增大。如果你的样品不是那么贵的话，就以不同浓度地走个标曲呗。
另外，你的乙腈比例是很低的，要注意柱子残留污染的问题（你目标峰之外的物质），冲好柱子，否则可能出现做久了，重现性差的问题