24小时热门版块排行榜    

查看: 1102  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

[求助] 大唱杆菌JM109表达我的重组菌,无法表达怎么办

请问,我将含有tac启动子的重组菌转到大肠杆菌JM109中,测了很多次的SDS-PAGE就是看不到目的条带。是不是tac启动子在JM109中不能表达?还是我用IPTG诱导的温度37度不合适?或者更糟糕的说,是之前的构建有问题。但是自己反复想,就是想不出来那里出问题了。请大家帮忙想想办法哦!谢谢啦!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-16 13:45:13
如果确定你的载体及宿主都是能表达tac的话,那就只好换诱导条件了
另外不同的宿主诱导的效果不一样,所以也可以换不同的宿主试试。
如果实在都不行,就没办法了,蛋白表达也是很诡异的事情

嗯,我也是这么想的,今天改变条件再诱导一下,看看。谢谢各位的建议!
9楼2012-11-16 14:40:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-14 16:37:40
JM109是克隆宿主菌,表达蛋白的话应该用表达宿主菌,例如BL21,rosetter等,详细的可以自己百度一下。
另外你用的载体,是否适合表达,还是只是克隆载体,这些都有区别的。
你的日子如何,你的力量也必如何!
2楼2012-11-14 13:43:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuan6126

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
求助还搞那么多错别字,态度也忒那个啥了吧
另,这么业余的错误也能犯,也忒不认真了,好好学习2楼的指导吧
3楼2012-11-14 13:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2012-11-14 13:43:52
JM109是克隆宿主菌,表达蛋白的话应该用表达宿主菌,例如BL21,rosetter等,详细的可以自己百度一下。
另外你用的载体,是否适合表达,还是只是克隆载体,这些都有区别的。

先谢谢你!关于这个问题,我也问过师兄,他说JM109可以表达连接tac启动子的重组菌。我选用了两种载体,PUC19和pEtac,不过都选用的启动子是tac启动子,现在的情况是,两种载体都没有表达。所以....不知道该怎么办了。
4楼2012-11-14 16:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +9 小熊joy 2026-03-14 9/450 2026-03-18 04:33 by anny19840123
[考研] 材料专硕306英一数二 +8 z1z2z3879 2026-03-16 10/500 2026-03-18 00:01 by 星空星月
[考研] 268求调剂 +3 简单点0 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:15 by wangjihu
[考研] 341求调剂 +5 捣蛋猪猪 2026-03-11 7/350 2026-03-17 19:09 by 捣蛋猪猪
[考研] 344求调剂 +4 knight344 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:27 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见