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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎么用玻璃珠破碎酵母，请指教
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475502411

铜虫 (著名写手)

[求助] 怎么用玻璃珠破碎酵母，请指教

最近做毕赤酵母的表达，但是遇到提取目的蛋白的问题，用蜗牛酶和超声的效果都不好，买了玻璃珠，但目前不知道怎么处理玻璃珠，怎么用？
希望各位大侠指教
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
1楼 2012-11-07 14:28:32
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475502411

铜虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小丹木木 at 2012-11-08 13:54:11
取适量菌液，离心留菌体
加入500微升的裂解缓冲液
然后等体积的加入玻璃珠
漩涡30s,冰浴30s,10次左右就差不多了...

玻璃珠的体积怎么算啊，我是大量的，有1g的菌体，我加5ml的裂解液和0.5g的玻璃珠，涡旋1min，冰浴1min，2200rpm离心收集上清备用，行吗？
谢谢
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
6楼2012-11-08 15:55:13
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
475502411: 金币+6 2012-11-08 12:58:57
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-08 13:51:17
你只买玻璃珠的话，是想手动磨粉吗？
你最好也买了玻璃珠破碎仪，那样就简单多了。玻璃珠体积点2/3-3/4,酵母悬浮液占其余部分，破1min,停2-3min，多破几个循环就可以了。
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2楼2012-11-07 14:48:30
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lillian菲

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
475502411: 金币+4 2012-11-08 12:59:01
是滴，用玻璃破碎仪就可以了
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3楼2012-11-07 17:19:08
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475502411

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yongbo_liang at 2012-11-07 14:48:30
你只买玻璃珠的话，是想手动磨粉吗？
你最好也买了玻璃珠破碎仪，那样就简单多了。玻璃珠体积点2/3-3/4,酵母悬浮液占其余部分，破1min,停2-3min，多破几个循环就可以了。

没有，我是想用斡旋仪，我们实验室没有专门的玻璃珠破碎仪，看有人说斡旋1min，冰浴1min，重复20次，2860g离心就行了
不知道可以吗？
玻璃珠的量怎样加？
我买的是0.5的玻璃珠
还不知道怎么用
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
4楼2012-11-08 12:58:34
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