配制PCR反应体系在碎冰上好，还是经-80℃冰冻过的冰上好呢？ - 分子生物 - 综合其他 - 第5页小木虫论坛-学术科研互动平台

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jl860822

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无所谓吧，应该都可以的

41楼2012-11-09 08:50:37

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wangwenxia16

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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-09 14:24:03

除了酶之外都可以在室温下配，酶最后从冰箱里拿出来，放在冰盒或碎冰上加，不用-80度，酶保存也只要-20度。PCR结果不理想可以优化PCR条件，如退火温度，延伸时间等

42楼2012-11-09 12:37:50

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轻清1106

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42楼: Originally posted by wangwenxia16 at 2012-11-09 12:37:50
除了酶之外都可以在室温下配，酶最后从冰箱里拿出来，放在冰盒或碎冰上加，不用-80度，酶保存也只要-20度。PCR结果不理想可以优化PCR条件，如退火温度，延伸时间等

好的，谢谢！我用的是优化过的体系。现在发现稀释好的DNA只能用3、4天，是保存的问题吗？

43楼2012-11-10 16:36:52

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轻清1106

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40楼: Originally posted by titus0805 at 2012-11-09 08:42:58
以前taq酶送来了没人放冰箱，20多度放了一宿，后来照用，话说那是我用的第一管taq酶，感觉后面的都不如它好用

这么牛啊。。怎么我的就不行呢。。

44楼2012-11-10 16:39:06

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xlast

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冰水混合物，0度就可以。-80度会冻上的吧

45楼2012-11-10 19:16:13

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tulip1213

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我从来都是室温，DNA模板很稳定，不会降解

46楼2012-11-10 20:05:38

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45楼: Originally posted by xlast at 2012-11-10 19:16:13
冰水混合物，0度就可以。-80度会冻上的吧

是的。会冻上。

47楼2012-11-10 22:50:30

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lxbxk

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如果是高保真酶的话，用碎冰要好一点，如果是Taq酶，可以不要冰

做开心的自己，加油

48楼2012-11-11 00:47:03

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kanglingle

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告诉你大神怎么做：全程不用冰，效果照样很犀利。
关键不在用不用冰

49楼2012-11-11 01:26:41

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q307078056

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告诉你医院的技术员怎么做的：
晚上18点把试剂盒带回家（背包里放着过夜），第二天早上9点到医院分装试剂，然后10点再去提取核酸，接着11点点样上机~~~~~

人生不是一种享受，而是一桩沉重异常的工作

50楼2013-02-27 16:49:45

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