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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 配制PCR反应体系在碎冰上好，还是经-80℃冰冻过的冰上好呢？
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竹子小小

木虫 (小有名气)
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-11-05 20:11:27
不要-80啊，也不用碎冰。你们实验室可以用冰盒啊。上面是密封的EP管架，下面是冰。DNA不能用不是冰的问题。是你保存的问题。即使我们室温操作问题也不大的，你想PCR是多少度？每次PCR都1-2小时，你还担心PCR体系撑不住这几分钟？用冰主要是酶的母液反复冻融不太好。
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11楼2012-11-05 16:37:12
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review

银虫 (著名写手)
室温都没问题
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交流
12楼2012-11-05 16:51:25
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ybQuan

金虫 (著名写手)
★
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告诉你大神怎么做：全程不用冰，效果照样很犀利。
关键不在用不用冰
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哥在江湖漂，很少不挨刀，不是愿意挨，是哥很无奈!
13楼2012-11-05 17:32:26
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苏青昆明

新虫 (初入文坛)
★
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冰里能好点    你可以试试的
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14楼2012-11-05 18:07:19
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messi1910

铜虫 (初入文坛)
★
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个人同意三楼的观点，一般情况下放不上冰上感觉无所谓，样多了加Taq酶的时候放到冰上加就可以了
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15楼2012-11-05 18:17:15
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huanshi

银虫 (小有名气)
★
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随便做，习惯室温做，大夏天也是，关键引物要设计好！
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16楼2012-11-05 18:34:24
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)
★
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不放冰，样品也只保存到4度也许会更好！
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低调稳重务实内敛---------------残
17楼2012-11-05 19:10:59
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)
★
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碎冰就足够了……楼主这个太夸张了吧……
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18楼2012-11-05 20:07:56
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通缉要饭

金虫 (著名写手)
★
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完全没有必要这么在意这些，个人觉得，如果加样时间短，完全不用冰都可以。

有些试剂反复冻融反而不好
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19楼2012-11-05 22:26:19
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dy_414

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
-80？taq酶是溶于50％甘油的，那肯定会冻融的，酶活下降很厉害。不严格的话室温就行，一半的模板都不会变性的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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我坚信，rp是攒出来的
20楼2012-11-05 23:16:33
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