配制PCR反应体系在碎冰上好，还是经-80℃冰冻过的冰上好呢？ - 分子生物 - 综合其他 - 第4页小木虫论坛-学术科研互动平台

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轻清1106

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24楼: Originally posted by tjwade at 2012-11-06 09:15:47
最近跑胶经常有二聚体。。

嗯嗯，是有这个问题，时不时有二聚体出现。。

31楼2012-11-06 10:01:40

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竹子小小

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30楼: Originally posted by 轻清1106 at 2012-11-06 10:00:30
DNA稀释之后，我是存放在4度冰箱的啊。。按理来说不应该有问题的呀。结果就是三四天体系就有问题了。重新稀释就会好，也怀疑过是污染的问题，但是自己操作没发现有什么问题。体系优化的时候（碎冰），DNA也是用了半 ...

哦，我们DNA是放负20保存的。。。4度就不知道啦，师兄师姐说不行

32楼2012-11-06 10:11:04

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dafeizizhu

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我添加PCR反应体系都是在室温下做的，从来不考虑什么温度问题。加完了就去PCR，一样出结果。

33楼2012-11-06 10:42:16

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wxlzzzz

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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-11-09 14:23:39

没有影响，-80℃冻过的冰和碎冰都可以。用-80℃的冰有些融化好的试剂会重新结冰，像水，引物和dNTP这些盐浓度比较低的工作试剂会重新结冰的。这样反复冻融对引物不利，建议将引物另外放置，或者引物直接放在室温。

你做了什么，什么都没做。

34楼2012-11-06 10:48:59

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其实是没有关系的。有冰就用，没有的话就不用
跑PCR的过程周还不是很高的温度变化范围
只要把个体系加进去就行，和的引物对什么都没有那么多要求的

可以朝九晚五，也能浪迹天涯

35楼2012-11-06 11:46:08

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lizt

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一般常温就可以，如果做不出来，或者有杂带，再放到一般冰块上就行了。
PCR皮实的很，没那么娇贵。

学如逆海行舟

36楼2012-11-06 14:01:27

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希罗雅

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用冰块就好啦

凡事学习

37楼2012-11-08 21:09:28

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lqlmdyw

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我们实验室做PCR实验时,一般都放在冰盒上配体系.

38楼2012-11-08 22:20:01

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710002191

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其实真的没关系的，我们一般加那个酶的话就用-20℃的冰盒就行了

may

39楼2012-11-09 08:24:54

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titus0805

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以前taq酶送来了没人放冰箱，20多度放了一宿，后来照用，话说那是我用的第一管taq酶，感觉后面的都不如它好用

40楼2012-11-09 08:42:58

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