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western blot 出不来结果！！！
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各位达人，我刚开始做western，不过也做过好多次了，每一次要么是什么都没有，要么是有若隐若现的条带，结果总是不好。请问是怎么回事啊？ PS：用考马斯亮蓝染色，发现胶上基本没有蛋白了，可在曝光后用丽春红染膜后没有发现蛋白条带，但在网上查，说有的没染出来也能做出来啊！ 谢谢各位了~~  |
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送鲜花一朵
12楼2012-11-08 20:08:53
wenzonglu
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2楼2012-11-03 14:23:16
wsgcc
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发高质量帖 2012-11-03 17:19:29
山水506: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢了 2012-11-07 21:21:42
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Western是要比考染敏感，肉眼看不到的条带也wetstern可出条带。我觉得楼主的问题可以进行以下尝试： 1.可以同时跑两块一样的胶，一块直接考染，一块转膜后考染，进行一下对比； 2.买个预染蛋白Marker一起跑、转,这样转没转过去，一目了然，国产的预染Marker也不贵； 3.胶上蛋白没了，丽春红膜上没染出来，是不是转过了，直接到膜底下的滤纸上去了，用PVDF膜要好些。 以上仅供参考，祝实验顺利，呵呵。 |
3楼2012-11-03 14:48:02
4楼2012-11-03 15:03:21