| 查看: 1778 | 回复: 2 | |||
[求助]
体外转录
|
大家好，我最近在做体外转录的时候遇到一个问题！我所需要转录的目的片段是插入到pcDNA3.0这个载体中的EcoRI这个酶切位点中，片段长度为2146bp, 我用BglII和XhoI这两个酶分别进行线性化，然后T7转录酶(fermentas)进行转录，但是无法转录得到正确大小的片段，电泳图显示转录之后的RNA条带的大小在marker500 bp的位置以下，无论是跑变性胶还是跑非变性胶都是这个结果！我尝试增加T7聚合酶的量，以及延长转录时间，转录过夜，都没有效果。但是我同时在做的另外一个片段（约500 bp），转录可以得到正确大小的条带。 请有经验的同志们分析一下可能的原因！ 图.png |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有185人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
fuweilin2013
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 27.8
- 帖子: 10
- 在线: 12.2小时
- 虫号: 2569423
- 注册: 2013-07-28
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
2楼2013-10-27 21:31:53
machao8405
木虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 6292
- 散金: 31
- 红花: 4
- 帖子: 740
- 在线: 216.3小时
- 虫号: 884679
- 注册: 2009-10-26
- 性别: GG
- 专业: 植物学
3楼2013-11-04 17:06:19