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2011加油

银虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 9 (幼儿园)
金币: 722.8
帖子: 382
在线: 177.9小时
虫号: 1210848

[交流] 细胞凋亡实验，请教消化问题，欢迎大家前来指导

大家好，我最近头一回做了凋亡实验，可能是消化（不含EDTA胰酶）没有掌握好，导致溶剂对照组中出现较多的早期凋亡细胞（30%多的比例），收集前显微镜下观察该组细胞时，没有太多细胞出现脱落，从得到结果分析，有可能是消化过度了，造成假阳性结果。我铺板是6孔板，请问大家每孔加入多少胰酶，是否是看到细胞变圆未脱落前，就开始终止消化，这样的效果会较好吗？？？请战友们多多指导，求下回实验顺利！谢谢大家

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1楼 2012-11-01 09:27:15

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dumbooo

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 606.5
帖子: 2
在线: 2小时
虫号: 3955583

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我认为首先要根据细胞而定，需要摸索细胞的特性，即使是贴壁细胞，也有贴壁性强弱之分，通常是消化至有少数细胞开始脱落便可终止消化然后进行吹打，6孔板的话，我认为500ul左右应该可以了，只要能覆盖细胞就够了，另外如果细胞本身状态不是很好，比如传了很多代以后，可能也容易效果不好，综合来讲，我认为主要还是摸清细胞特性。