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落泪天使

新虫 (初入文坛)

[求助] 抗体的选择

我的基因是从毛竹中得到的，现在想做Weatern blotting，需要一抗，我曾经看文献，大麦中的这个同源基因做Weatern blotting用的是拟南芥中的一个抗体，那我可不可以直接将这个抗体买来，做我的这个？  像这种通用抗体，杂交的情况怎么样？有做过这种实验的吗？
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1楼 2012-10-30 14:47:15
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先要看两个蛋白同源性。其次要看同源蛋白的抗体是怎么做的。如果抗体是免疫全蛋白做的，而且与你的目的蛋白同源性很高，希望是比较大的，值得试试看。如果抗体是免疫多肽做的，要查看做抗体用的多肽序列在你的目的蛋白中是否保守。而多数情况下的多肽抗体不能跨物种使用。
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2楼2012-10-31 08:09:48
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遥控器68

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
便宜的话买来试试，考虑经济的话不如用毛竹的直接制作全蛋白或者短肽抗体。当然目的要清楚，才能做决定。
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3楼2012-10-31 09:51:50
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mutant

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你先看看文献上关于拟南芥中此基因的一抗是利用全蛋白做的，还是免疫活性多肽片段合成做的。假如是全蛋白做的，你比较毛竹和拟南芥的此基因的同源性，假如同源性高，那就可以使用。免疫活性多肽片段合成的抗体，是根据基因自身序列设计合成的，也得比较保守性，才能使用。假如时间和经费宽裕的话，可以直接找公司，设计并且合成多肽片段。
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4楼2012-10-31 16:08:06
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