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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 若回收胶，跑电泳应加多少样品
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xulu2008

金虫 (正式写手)

[求助] 若回收胶，跑电泳应加多少样品

我想通过跑电泳得到目的基因的条带，再回收胶，那每孔应加多少pcr产物呢（大孔）？；loadingbuffer加多少
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1楼 2012-10-26 11:51:28
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 小小虫2012 at 2012-11-02 10:04:39
那一般做200-1000bp以内的片段回收，胶的浓度大概是多少合适啊？还有点样时要不要加buffer，我是用RNA反转录做克隆的。...

一般胶浓度在1%到2%之间，片段大的话浓度就低点，片段小的话浓度就高点啦，你这个片段可以用1.5%到2%之间的浓度的胶，其实这个没多大影响。。。
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keepon
16楼2012-11-02 13:57:43
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hj890509

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-28 17:52:44
孔不同加样量也不同，大孔有30ul和50ul的，我们做的时候50ul样品中加了10ulbuffer
点样量为30ul
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2楼2012-10-26 12:00:10
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杰-米尼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也是新手。现在每次回收我都是每个孔加80ulPCR产物，loadingbuffer相应多加一些就是了
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做科研还是需要好的逻辑能力的 加油
3楼2012-10-26 12:00:13
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
就是30ul左右，你的样品可以全加的啊
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让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
4楼2012-10-26 12:16:33
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