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xulu2008

金虫 (正式写手)

[求助] 若回收胶,跑电泳应加多少样品

我想通过跑电泳得到目的基因的条带,再回收胶,那每孔应加多少pcr产物呢(大孔)?;loadingbuffer加多少
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小小虫2012

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-10-28 16:46:59
1、胶的浓度主要看你的目的基因的大小,一般1%到2%,大的话浓度就低点,小的话浓度就高点。
2、至于loading buffer的问题,正如楼上所说的,看你的loading buffer是几X的,是几X的loading buffer 最终loading buff ...

我现在是新手,碰到了问题,今天刚做回收,检测时亮度还可以,但是回收时,在紫外灯下目的带很弱。我跑的是50ul,分了两个孔,没有加loading buffer,胶的溶度在1%,不过我还是回收了,把回收的片段放在-20度下。因为不知道接下来怎么办?要不要继续连接,有人给我好的建议吗?
12楼2012-11-01 21:22:55
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hj890509

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-28 17:52:44
孔不同加样量也不同,大孔有30ul和50ul的,我们做的时候50ul样品中加了10ulbuffer
点样量为30ul
2楼2012-10-26 12:00:10
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杰-米尼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也是新手。现在每次回收我都是每个孔加80ulPCR产物,loadingbuffer相应多加一些就是了
做科研还是需要好的逻辑能力的 加油
3楼2012-10-26 12:00:13
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
就是30ul左右,你的样品可以全加的啊
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
4楼2012-10-26 12:16:33
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