| 查看: 7899 | 回复: 26 | |||
[交流]
在PCR仪中，从95度均匀降温到25度，怎么弄才能90s降温1度？
|
|||
|
最近，我要自己合成接头，接头的序列都知道，也从公司合成了单链，现在要把接头的两条单链通过退火来合成双链的。从网上看到碧云天的退火buffer，都说挺好使的，就买了。仔细阅读说明书后，才发现，里面有一个均匀退火的步骤，不好弄。是这样说的，每8s降温0.1度，如果PCR仪不具备这种功能的话，也可以90s降温1度。我从我们使用的PCR仪（ABI 2720）上，怎么弄都弄不好。从别的实验室找PCR仪，找到的能设置降温速度的，但是他们那里设置的*.*℃/s，看这格式，最慢的速度是0,1度每秒，而我要求的是0.01度每秒。又打算使用多不保温步骤来设置，90s降温1度，需要70步，但是PCR仪上最多六个HOLD 步骤。崩溃。。。。。。。 求助各位大仙们，有什么好的办法吗？ 注：我从网上看到把水烧开，放到室内，把要退火的体系放进去，让开水自然冷却，之后就能使用。这个方法很不错的。但是我们老师听到这个方法后就直接给我回绝了。想想，开水自然冷却，开始的时候降温快，随后降温速度慢，整体降温不均匀，可能会影响实验。但是 ，在退火过程中，降温的快慢又有什么影响呢？在普通PCR过程中，退火时的降温速率很快的，引物同样能结合到模板上，而均匀降温又是何解？大仙们，给个答案吧！please！ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有155人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 中科院大连化学物理研究所人员招聘
已经有3人回复
- 2011年博士点基金联合资助课题立项公布
已经有3人回复
- 【交流】生物实验小技巧－抛玉引玉(欢迎大家分享自己的经验与技巧~~)
已经有48人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
- 生物学软件介绍及其下载地址【学生物的会很有用】
已经有24人回复
- 【中国科学院部分项目介绍】绝无仅有，可以提供科研思路，很不错的
已经有858人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
告别流水线爽文！108万字完结仙侠《女娲石之灵石奇缘（仙界篇）》值得细品
+1/5585
-
小木虫认识的老公在一起11年，去世快100天了。
+2/1596
-
2026年工程管理与智慧城市国际会议 (EMSC 2026)
+1/909
-
基金祈福
+1/159
-
散金币
+1/126
-
上海交通大学张航课题组招聘博士后（电化学能量存储与转换）
+1/100
-
上海交通大学张航课题组招聘博士后（电化学储能）
+1/87
-
湖南大学袁达飞课题组招生2027年入学的COF或MOF薄膜合成背景的博士生一名
+1/45
-
清华大学环境课题组招聘环境工作专业客座生研究生2-3名（应用导向）
+1/21
-
清华大学环境课题组招聘环境工作专业客座生研究生2-3名（应用导向）
+1/20
-
西南交通大学轨道交通运载系统全国重点实验室敬霖教授课题组招聘专职博士后
+1/19
-
【科研项目征集】一项可在 4—8 周完成的小任务，也值得被认真对待
+1/9
-
单细胞测序样本制备与质控运输全流程指南
+1/5
-
南京大学 智能驱动与感知材料实验室 诚招申请考核博士生/科研助理/博士后
+1/4
-
中科院大连化学物理研究所 招聘 催化剂研发方向 科研助理 2名
+1/4
-
祈祷老公中国基
+1/3
-
南方医科大学深圳医院陈烨/余涛教授课题组联合培养博士后招聘
+1/3
-
新审查指南施行半年，AI方向的专利申请是不是更看"技术味"了？
+1/2
-
出全新蔡司 Plan?APOCHROMAT 20×/0.8 平场复消色差物镜
+1/2
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
+1/1
2楼2012-10-25 12:07:32
3楼2012-10-25 14:44:26
16楼2012-10-25 15:56:02
22楼2012-10-25 18:06:12
23楼2012-10-26 10:18:21
24楼2012-10-26 10:33:37
25楼2012-10-27 20:00:21
26楼2012-10-27 20:01:21
27楼2018-09-26 15:11:20
简单回复
2012-10-25 14:48
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
fuhanmei5楼
2012-10-25 15:03
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
wasxnbe6楼
2012-10-25 15:09
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
2012-10-25 15:10
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
2012-10-25 15:20
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
2012-10-25 15:26
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
yahoo345110楼
2012-10-25 15:40
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
lanse784111楼
2012-10-25 15:45
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
wuyun12312楼
2012-10-25 15:48
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
男的糊涂11113楼
2012-10-25 15:50
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
liang888714楼
2012-10-25 15:53
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
空悲切的娃15楼
2012-10-25 15:53
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
woai82017楼
2012-10-25 15:58
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
太阳345218楼
2012-10-25 16:00
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
梦想可能19楼
2012-10-25 16:03
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
chenghu20楼
2012-10-25 16:11
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
but水货21楼
2012-10-25 16:14
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
