| 查看: 7484 | 回复: 26 | |||
[交流]
在PCR仪中，从95度均匀降温到25度，怎么弄才能90s降温1度？
|
|||
|
最近，我要自己合成接头，接头的序列都知道，也从公司合成了单链，现在要把接头的两条单链通过退火来合成双链的。从网上看到碧云天的退火buffer，都说挺好使的，就买了。仔细阅读说明书后，才发现，里面有一个均匀退火的步骤，不好弄。是这样说的，每8s降温0.1度，如果PCR仪不具备这种功能的话，也可以90s降温1度。我从我们使用的PCR仪（ABI 2720）上，怎么弄都弄不好。从别的实验室找PCR仪，找到的能设置降温速度的，但是他们那里设置的*.*℃/s，看这格式，最慢的速度是0,1度每秒，而我要求的是0.01度每秒。又打算使用多不保温步骤来设置，90s降温1度，需要70步，但是PCR仪上最多六个HOLD 步骤。崩溃。。。。。。。 求助各位大仙们，有什么好的办法吗？ 注：我从网上看到把水烧开，放到室内，把要退火的体系放进去，让开水自然冷却，之后就能使用。这个方法很不错的。但是我们老师听到这个方法后就直接给我回绝了。想想，开水自然冷却，开始的时候降温快，随后降温速度慢，整体降温不均匀，可能会影响实验。但是 ，在退火过程中，降温的快慢又有什么影响呢？在普通PCR过程中，退火时的降温速率很快的，引物同样能结合到模板上，而均匀降温又是何解？大仙们，给个答案吧！please！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有255人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 中科院大连化学物理研究所人员招聘
已经有3人回复
- 2011年博士点基金联合资助课题立项公布
已经有3人回复
- 【交流】生物实验小技巧－抛玉引玉(欢迎大家分享自己的经验与技巧~~)
已经有48人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
- 生物学软件介绍及其下载地址【学生物的会很有用】
已经有24人回复
- 【中国科学院部分项目介绍】绝无仅有，可以提供科研思路，很不错的
已经有858人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
专业技术开发及第三方检测
+1/87
-
有没有在香港的虫友啊
+1/86
-
坐标广州，男征女，双向奔赴
+1/69
-
上海交大化院功能大分子团队招2026年硕士、联培、博士后
+1/38
-
纺织科学与工程、材料化工方向招收研究生
+1/28
-
福建师范大学化学与材料学院杜克钊团队博士/硕士招生
+1/14
-
211/双一流石河子大学化学化工学院--电催化，CO2转化
+1/11
-
博士后招聘（高薪40万+）
+1/7
-
香港大学David Srolovitz教授课题组招聘「香江学者」博士后
+1/7
-
26年博士招生
+1/6
-
2026考研的同学，分数不够？想调剂上岸的同学，来看
+1/6
-
上海第二工业大学-朱大海课题组招生（过线就能调剂）
+1/5
-
武汉工程大学化学与环境工程学院诚聘师资博士后 通过考核可留校任教 （长期有效）
+1/5
-
武汉工程大学化学与环境工程学院赵庆彪教授团队诚聘人才（长期有效）
+1/5
-
海南大学徐月山老师招生第二批博士名额2~3个，2026年9月份入学（高端设备开发方向）
+1/2
-
西北师范大学化学化工学院李健教授课题组接受化学、化工、材料类研究生调剂！
+1/2
-
层流压差式流量测控产品在大气运维采样流量校准中的应用与优势
+1/1
-
085404 270求调剂，b区求导师收留接受跨专业
+1/1
-
澳大利亚科学院院士Prof.Gordon Wallace, University of Wollongong 全奖博士机会
+1/1
-
211/双一流石河子大学化学化工学院-电池/电催化研究方向
+1/1
2楼2012-10-25 12:07:32
3楼2012-10-25 14:44:26
16楼2012-10-25 15:56:02
22楼2012-10-25 18:06:12
23楼2012-10-26 10:18:21
24楼2012-10-26 10:33:37
25楼2012-10-27 20:00:21
26楼2012-10-27 20:01:21
27楼2018-09-26 15:11:20
简单回复
2012-10-25 14:48
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
fuhanmei5楼
2012-10-25 15:03
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
wasxnbe6楼
2012-10-25 15:09
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
2012-10-25 15:10
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
2012-10-25 15:20
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
2012-10-25 15:26
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
yahoo345110楼
2012-10-25 15:40
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
lanse784111楼
2012-10-25 15:45
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
wuyun12312楼
2012-10-25 15:48
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
男的糊涂11113楼
2012-10-25 15:50
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
liang888714楼
2012-10-25 15:53
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
空悲切的娃15楼
2012-10-25 15:53
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
woai82017楼
2012-10-25 15:58
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
太阳345218楼
2012-10-25 16:00
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
梦想可能19楼
2012-10-25 16:03
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
chenghu20楼
2012-10-25 16:11
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
but水货21楼
2012-10-25 16:14
回复
dafeizizhu(金币+1): 谢谢参与
